脑缺血动物造模实操注意事项

一、大脑中动脉栓塞(MCAO)模型造模操作注意事项

1、分离时要层次清楚：正中切开SD大鼠颈部皮肤，分离皮下结缔组织时会发现该组织与颈部两侧鼓泡腺体(很多人误认为那是甲状腺)结合紧密，因此不必分离过于太细，直接在正中两侧鼓泡腺体之间分离，这样能不接触胸锁乳突肌而直接暴露颈前肌群且不会损伤腺体造成过多出血。下一步是分开颈前肌群，这时候要注意用小钳子作撑开，分离动作要在左右肌肉块之间而不是一块肌肉的肌纤维之间，虽然它们看起来很模糊，但这样能保证不会出现较多条索状细肌纤维条，影响下一步颈内动脉的寻找与分离，并且能整块地向一侧牵开颈前肌群暴露颈动脉鞘。见到颈动脉鞘了则要注意细致分离迷走神经，若损伤则可能影响其呼吸而死亡的。

2、血管分离管时，要量将血管剥离的干净些，这样在用眼科剪剪口时就不会误剪外膜(误剪的话再剪就很容易把口剪大了或者剪断了，要注意口子越小越好插线)，且要剪一个斜行的切口(眼科剪与血管约成45度)，这样在血液刚流出时仍能看上翻的断口管壁，这样既容易插入栓线且血管受得了插线时一定的牵拉。当然，切勿牵拉过猛，以免使血管发生痉挛，导致栓线不能顺利进入。

3、注意尽量不要损伤神经。

4、线进入后颈内动脉后即可逐渐插入了，有时候很顺利一插到底，但有时候在中间就怎么也进不去了，这是因为在血管入颅穿过颅骨时有一个狭窄或者角度。因此，碰上这种明显阻力时，一定不能盲目向前使力插，越插栓线前端越变形越进不去且容易损伤血管。这时候正确的作法是往外抽出较多栓线，也许会有一定的动脉血流出，不必慌，只要顺着血管走向调整一下进线角度轻柔的使劲，一般都能进去，反复试几次还不行最好换根栓线，很可能前端已经角度变了!颈内动脉的走向为内上方，可以用镊子夹住鱼线插，但进去后要注意，别太用力，要不血管就要破了。

5、栓线不能在血管里反复进退，否则及容易造成蛛网膜下腔出血，而且很容易误解为模型成功，因为这时的神经功能改变也很明显，但并不是由于栓塞引起的。

6、进线时，使栓线有一定程度的弯曲，且只要保证栓线向颅顶方向弯曲，一般都能将线插入颅内，决不会进入翼腭。

7、术后注意保暖。

8、性激素对脑梗死面积有较大影响，应采用单一性别的动物进行实验。

9、大鼠大脑中动脉永久性闭塞性脑缺血模型，梗死体积出现的最小时间点可能为2h，体积随时间进行性增大，至12h基本趋于稳定。

10、对干插线已经熟练的操作者来说，如果一次遇到大多数动物插不进线去或者死亡率特别高，就要考虑是否是动物的问题。动物往往出现血管变异，尤其是饲养很久的动物，动物来源对死亡率影响很大。

二、血管阻塞慢性脑缺血模型造模注意事项

1、在手术过程中，直肠和大脑的温度必须控制在(37±0.2)℃。大脑的温度尤其重要，因为没有血供会引起大脑温度的下降；而大脑温度的微小变化对于缺血引起的组织学损伤会产生显著的影响。

2、手术前夜对小鼠禁食以维持血糖水平的稳定同样非常重要。卒中前高水平血糖通常会引起更加严重的神经元损伤。