肝纤维化动物造模步骤上篇

一、CCl4诱导大鼠肝纤维化模型实验步骤

CCl4诱导大鼠肝纤维化模型的造模机制：CCl4为一种选择性肝毒性药物，其进入机体后在肝内活化成自由基如三氯甲基自由基(CCl3)，后者可直接损伤质膜，启动脂质过氧化作用，破坏肝细胞的膜性结构等，造成肝细胞变性坏死和肝纤维化的形成。造模方法：大鼠：CCl4与橄榄油1:1比例混合均匀。小鼠：CCl4与橄榄油1:7比例混合均匀大鼠皮下、腹腔或口服给予配制好的造模剂，剂量为1-2ml/kg，每周2次，保证给药时间间隔一致，持续6-8周即可出现肝脏的纤维化症状。

1、实验动物、材料的准备

实验动物：

8周龄，体重为230±20g左右的SD大鼠

8周龄，体重为25±2g左右的C57Bl/6小鼠

实验材料：CCl4、橄榄油（植物油）、注射器

2、实验操作

（1）试剂配制：大鼠：CCl4与橄榄油1:1比例混合均匀；小鼠：CCl4与橄榄油1:7比例混合均匀

（2）CCl4诱导大鼠皮下、腹腔或口服给予配制好的造模剂，剂量为1-2ml/kg，每周2次，保证给药时间间隔一致，持续6-8周即可出现肝脏的纤维化症状。

（3）观察实验动物的病理变化位置：中心叶或门静脉区。

（4）CCl4易挥发，最好配置当天使用。在进行正式试验之前最好进行一次预实验，验证所选的动物及造模时间是否符合预期。

二、二甲基亚硝胺诱（DMN）导肝纤维化模型实验步骤

二甲基亚硝胺诱导肝纤维化模型造模机制：NDMA是一种致癌物，大剂量使用，NDMA进入肝细胞经微粒体代谢生成乙醛，后者引起肝细胞损害，肝坏死和肝纤维化。

1、实验动物、材料准备

实验动物：8周龄，SD大鼠，体重230±20g左右

实验材料：DMN，生理盐水

2、实验操作

（1）试剂配制：称量一定量的DNN，使用生理盐水按照10mg/kg的剂量进行配制。

（2）3次/周腹腔注射，连续给药大于4周，检测相关肝脏损伤和纤维化指标以便判断纤维化是否发生。

（3）观察实验动物病理变化位置：汇管区纤维化（中央门静脉区）

（4）实际的操作中我们要注意：给药方式理论上是每周给药三次，但要根据实际动物状态，调整给药的频率，适当的减少或者增加，若减少频率需增加给药时间，增加给药频率可适当减少给药时间，但一般都要持续4周。