小鼠肠炎造模操作步骤

硫酸葡聚糖属于葡聚糖的聚阴离子衍生物，由葡聚糖和氯黄酸的酯化反应形成。其中含硫量约为17%，相当于葡聚糖分子的每个葡萄糖残糖中平均含1.9个硫酸基团。白色或淡黄色粉末。易溶于水，微溶于乙醇。10%水溶液为无色或淡黄色澄清溶液。如需灭菌，防止降解，应配成缓冲体系(如碳酸氢钠)。自1985年首次报道采用葡聚糖硫酸钠制备出仓鼠溃疡性结肠炎模型以来，已有大量研究证明，DSS结肠炎模型与人类溃疡性结肠炎相似。DSS结肠炎模型的组织学特点、临床表现、发病部位和细胞因子情况都与人类溃疡性结肠炎(ulcerativecolitisUC)极为相似。该模型的造模条件和操作方法简单，造价便宜，重复性好，便于掌握和推广;可根据实验目的调整DSS浓度和给药时间，建立急性、慢性和急慢性交替性模型。

【小鼠肠炎造模的实验操作方法】

通常用纯水制成DSS溶液给予动物自由饮用造模。有时配合偶氢甲烷(AOM)联合造模。采用不同的DSS浓度(W/V)、给药时间和给药频率，可制成急性和慢性两种结肠炎模型(IBD)。急性结肠炎模型常采用较高浓度DSS溶液和相对短的给药时间建立。如:3%-5%DSS溶液自由饮用4-7天。慢性结肠炎模型则可采用低浓度DSS，长时间给药建立。如给予大鼠1%DSS溶液自由饮用120天。

【急性肠炎小鼠造模步骤】

1、第一天称重和标记小鼠

2、加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5mLDSS溶液/小鼠/天加量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水

3、第3天清空笼内剩余的DSS饮用水，每两天换一次重新装满DSS溶液

4、第8天清空笼内剩余的DSS饮用水，换上不含DSS的无菌水

【慢性肠炎小鼠造模步骤】

1、按照急性结肠炎造模步骤进行到第3步

2、第8天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水持续到14天

3、第22-26天重复急性结肠炎造模步骤

4、第29天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水持续到14天

5、第43-47天重复急性结肠炎建模步骤

6、第50天用无菌水换掉笼内剩余的DSS溶液

【肠炎造模注意事项】

1、肠炎模型需要控制好DSS剂量，动物未出现预期效果或死亡率较高，出现上述情况一般跟药物剂量有关；

2、一般实验室构建的为急性肠炎模型，不适宜做长期给药实验；

3、肠炎发作部位以结直肠最为明显，后续取材检测一般选择结直肠段。