耐药细胞株构建注意事项

　　耐药细胞培养的优点：

　　1.研究的对象是活细胞

　　在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

　　2.研究条件可以人为控制

　　pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，产品仅供科研可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

　　3.研究的样本可以达到比较均一性

　　通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

　　4.研究内容便于观察、检测和记录

　　采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。

　　耐药细胞的实验要点说明：

　　1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

　　2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理；

　　3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

　　4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。