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细胞技术

什么是免疫荧光技术?

2025-02-11 细胞技术 加入收藏
免疫荧光技术是以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法

免疫荧光技术是以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗体技术,或称为免疫荧光技术。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。

免疫荧光技术的原理是:免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。

那这么常用的免疫荧光有什么优缺点呢?

免疫荧光的主要优点是:特异性强、敏感性高、速度快;缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。

免疫荧光的分类主要有:

荧光抗体技术

抗原抗体反应后,利用荧光显微镜判定结果的检测方法。

免疫荧光测定

抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法。

那么免疫荧光技术有哪些临床诊断上的意义呢?

1、直接免疫荧光技术临床意义

1)细胞间荧光提示天疱疮。

2)基底膜荧光带:在系统性红斑狼疮、盘状红斑狼疮的皮损,均可见颗粒状的以IgG为主的带状分布。在类天疱疮为线状的以IgG为主的带状分布。

3)在真皮内血管壁见到圈状荧光提示血管炎。

2、间接免疫荧光技术临床意义

1)风湿性结缔组织病:红斑狼疮、硬皮病、干燥综合征、类风湿性关节炎等。

2)增生性疾病:高球蛋白血症性紫癜、巨球蛋白血症、淋巴瘤、慢性白血病、癌肿等。

3)感染性疾病:结核病、瘤型麻风、组织胞浆菌病。

抗核抗体本身并非特异,滴度和核型对诊断也有重要参考价值。因此除定性外,还应结合滴度、核型及临床体征才具有较大价值。

3、补体结合法

常用来检测患者的自身抗体,如妊娠疱疹患者。


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