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细胞技术

做稳定转染如何选择质粒提取试剂盒

2025-03-01 细胞技术 加入收藏
相关专题 总有一种转染方法适合你问:我想用质脂体转染 法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请

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问:我想用质脂体转染 法将质粒稳定转染入肿瘤细胞,请问可以选择哪种试剂盒? 因为我不报销费用,所以想选一种即好用又较为便宜的,请求指点。谢谢

答:您的情况我们去年也曾遇到过。目前市面上的质粒提取试剂盒林林总总,令人难以取舍。我觉得首先应该根据自己的需要来选取。进口的试剂盒,比如qiagene,omiga,promega等固然好,但是价格较贵,如果自己的实验要求不是很高的话,用这些试剂盒感觉有浪费的嫌疑(当然经费充足无可厚非)。但是有些国产的试剂盒不怎么令然放心,象楼主这样做稳定转染 的,要花费很多的时间和精力,最后因为试剂盒的问题影响实验的进度有点得不偿失,而且脂质体都比较贵。因此,性价比是最重要的因素。大部分的质粒提取试剂盒所得产物可分为如下几个级别:

1.高级转染 级:这是最高纯度的去内毒素的质粒纯化,主要使用于基因治疗,cell显微注射,原代细胞转染等。

2.常规转染 级:它要优于2次cscl超速离心纯化的质粒。

3.分子 生物学级,相当于1次cscl超速离心纯化的质粒。

4.测序级:主要用于常规酶切与连接用。

我们实验室用过qiagene,axgene,omiga和国产天根的。大家对qiagene的评价最好。但是我自己的经验(qiagene的漂洗液用完了)是用qiagene的吸附柱和天根的漂洗液联合得到的质粒最满意od26/od280为1.8(呵呵,只是个别案例,样本含量不足,仅供参考)。我只做过原代细胞的顺时转染,稳定转染我没有做过,建议楼主可以考虑大家评价较好(比如天根的)试试看。记得有些公司经常做活动给一些试用装,也可以尝试。楼主也可以结合其他战友的建议。


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