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细胞技术

如何得到稳定转染的细胞

2025-03-05 细胞技术 加入收藏
相关专题 总有一种转染方法适合你问:各位朋友,本人今天刚刚做了转染,用的24孔板,质粒 是带有荧光的(含neo基因的载体),如果转进去了,下一步就要进行筛选?但

相关专题 总有一种转染方法适合你

问:

各位朋友,本人今天刚刚做了转染,用的24孔板,质粒 是带有荧光的(含neo基因的载体),如果转进去了,下一步就要进行筛选?但是不知道具体该怎么做才能得到稳定转染的细胞?

答:

最好先做以下预实验,摸一下G418的浓度范围,以未转染的细胞做对照,当未转染细胞完全杀死作为最佳筛选浓度。在选择压力下待存活的细胞逐渐形成小克隆 后可以传代,随后可以逐步降低G418浓度至原使用浓度的一半作为维持压力。这样多代选择出来的细胞就是阳性克隆,也就是稳定细胞系了。


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