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生物化学

32个氨基酸的短肽检测

2025-03-21 生物化学 加入收藏
问:我最近用红系裂解物翻译系统表达一种32个氨基酸的短肽,因为实验条件有限,不能用35S标记的蛋氨酸进行合成,所以不能用放射自显影进行检测,我想问问能否用蛋白电

问:我最近用红系裂解物翻译系统表达一种32个氨基酸的短肽,因为实验条件有限,不能用35S标记的蛋氨酸进行合成,所以不能用放射自显影进行检测,我想问问能否用蛋白电泳的方法检测,我查文献看到有一种tricine gradient gel,不知道可不可以检测这种短肽?有没有人知道这种胶的配方?参考这个文献吧。

答:我分析小于10kd 的肽,就是参考的这一个。效果吗,很好呀!

答:体外翻译系统得到的蛋白不可用普通的电泳分离,只可用同位素标记做放射自显影,因为得到的量太少了,电泳看不到,而不在于胶的分辨率问题。其实S35的放射性很低,一层方便手套就挡住了。


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