脂类染色

一、脂类概述

脂类物质在人体中占有相当大的部分，通常它们在人体内以两种形式存在，第一种为脂肪，主要为中性脂肪，储存的部位如皮下，大网膜，肌间肾周围组织等部位，另外一种为结构脂肪，如磷脂，胆固醇等它们与蛋白，糖类结合在一起存在于细胞内，构成细胞的组成成分。

1、单纯脂质：由脂肪酸各醇化合的酯，如中性脂肪，油及蜡等，苏丹染料可染为黑色或红色。

2、复合物质，脂肪酸的酯经水解后生成醇类，脂肪酸，磷酸和含氮的碱基等，复合脂质分为磷脂和糖脂。

①磷脂：卵磷脂，脑磷脂和神经鞘磷脂。苏丹黑染色为阳性，PAS反应为阴性。

②糖脂，PAS反应呈阳性。

③衍生脂质：指尚具有脂质性质的单纯脂质或复合脂的水产物，属于这类的有脂肪酸和固醇类。

脂肪酸：硫酸耐尔蓝阳性，PAS阴性。

胆固醇及其酯：Schultz试验阳性。

组织化学的脂类物质：

1、中性物质，如甘油三酯，胆固醇及其酯，类固醇和某些糖酯。

2、酸性脂质，脂肪酸，磷脂。

二、苏丹III IV联合法（combined SudanIII IV method for lipids）

1、脂类组织的固定及固定液

脂类组织的固定特别要注意的问题，就是不要选择含酒精的固定液，因为酒精可把脂类物质溶解，因此，用于脂类物质的首选固定液是甲醛，它可较好地保存脂类物质。

2、试剂的配制：苏丹III0.2g，70%酒精50ml；苏丹IV0.5g丙酮50ml。

3、操作步骤：

（1）用经过甲醛固定过的组织作冰冻切片，厚约10-15um，切完后放入蒸馏水中，染色前放入50%-70%酒精洗。

（2）入苏丹III IV染液染5分钟，

（3）70%酒精分化，

（4）水洗，

（5）苏木素浅染细胞核，

（6）水洗，必要时分化，

（7）蓝化，如为漂浮染色，此时应将切片附贴于载片，

（8）甘油明胶封固。

结果：脂类物质呈现橘红色或鲜红，核蓝色。