糖含量测定
实验原理】 苯酚—硫酸 试剂 与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，己糖在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。 【实验材料】 1. 实验
实验原理】 苯酚—硫酸 试剂 与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，己糖在490nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。 【实验材料】 1. 实验器材 721型分光光度计。 2. 实验 试剂 (1) 98％ 的浓硫酸。 (2) 80％ 苯酚：80g苯酚加20ml水使之溶解，可置冰箱中避光长期贮存。 (3) 6％ 苯酚：临用前用80％苯酚配制。 (4) 标准葡萄糖溶液（0.1 mg/ml）：取100mg葡萄糖，用蒸馏水溶解，定容至1L。 (5) 多糖样品：半乳葡萄甘露聚糖溶液（0.1 mg/ml）。 【实验操作】 1. 制作标准曲线： 取9支干燥 试管 ，按下表操作
管号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
标准溶液（ml） | 0 | 0.4 | 0.6 | 0.8 | 1.0 | 1.2 | 1.4 | 1.6 | 1.8 |
蒸馏 水（ml） | 2.0 | 1.6 | 1.4 | 1.2 | 1.0 | 0.8 | 0.6 | 0.4 | 0.2 |
6％苯酚（ml） | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 | 1.0 |
浓硫酸（ml） | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 | 5 |
静止10分钟，摇匀，室温放置20分钟 | |||||||||
A 490 |
横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，绘制标准曲线。 2. 样品含量测定： 取样品液1.0ml，按上述步骤操作，测光密度。 3．计算: 糖含量(%)=C /（C0× V）×100% C: 由标准曲线查得的糖微克数 C0：样品溶液的浓度（0.1 mg/ml） V：测定时用的样品溶液体积（1.0ml）
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