invitrogen lipo2000转染试剂 资深用户操作经验总结（难能可贵）

lipo2000是各大实验室，科学院，技术实验室最常用的转染试剂，小小的试剂，价格不菲，经常听到客户说严格按照说明书来操作，还会出现这样或者那样的问题。客户经常抱怨东西贵，还做不出好效果。我公司请到经验丰富的专业人士，帮我们总结了使用lipo2000的一些小技巧，这可是资深人士的经验之谈。希望对广大科研使用者有所帮助！ 

Lipo2000

1. Lipo2000的保存：4℃保存和运输

2. Lipo2000的活性：由于Lipo2000是生物蛋白，在4℃保存和运输，所以就算是同一个批号的Lipo2000，只有在刚出厂分装时活性才是相同的。经过供应商的保存、运输（运输的温度控制各不相同），其活性将有细微的变化。

3. Lipo2000的优化：

3.1 由于每一管Lipo2000的活性都不太相同，其实就算是同一管，使用的时间长了，后期的活性跟刚开始用时也不太一样，所以在拿到一管新的Lipo2000时，一定要做一下活性优化；

3.3 如果一直使用Lipo2000做实验，优化的步骤可以简化：假设之前转化时每孔一直用4ul Lipo2000，那么优化的步骤可以简化为只用5个孔，每个孔中Lipo2000用量分别为3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul，其他条件不变，看那个

Lipo2000的用量结果最好，接下来的实验就用优化的用量。

4. Lipo2000的使用：

4.1 使用前将整管的Lipo2000混匀，分装，最好分成100ul/管；

4.2 实验前，将分装好的100ul Lipo2000和质粒DNA（或RNA）放到实验台上室温平衡，不需要冰上保存；

4.3 将Opti-MEM培养基放到水浴锅中37℃平衡；

4.4 按照说明书进行转染，注意控制好每一步操作的时间。

5. 切记并不是Lipo2000的用量越多越好，实际上，Lipo2000加多了，毒性会增加，细胞会死亡，转化效率会大幅降低。