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如何快速简单的保存提取血液RNA

2024-10-23 RNA 加入收藏
在用血液标本进行基因表达研究时,需要及时把新鲜血液中有核细胞的RNA提取出来。全血还不能直接放到-80℃保存,即使在-80℃保存,全血中的RNA也容易发生降解。

在用血液标本进行基因表达研究时,需要及时把新鲜血液中有核细胞的RNA提取出来。全血还不能直接放到-80℃保存,即使在-80℃保存,全血中的RNA也容易发生降解。传统的提取新鲜全血RNA方法是把先把有核细胞从全血中分离出来,需要加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁琐,在临床医院往往难以实施。作为RNA提取的领先公司,北京艾德莱的研发人员在05年国内首家研发成功液体样本RNA提取试剂RN01 TRIpure LS(LS 意思是Liquid Sample), 点此详见 。可以直接裂解全血提取RNA,避免了先裂解白细胞可能导致的RNA降解,也大大简化了操作步骤。操作时间比普通方法节约至少三分之一。

在临床上采血时,可以先把TRI pure LS Reagent分装750ul到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250ul全血样品加入到750ul的TRI pure LS Reagent中,用移液枪反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液保存在-20℃下可达2个月,-80℃可达半年。在此期间,可以把该裂解液运输到北京艾德莱生物公司进行RNA的抽提,运输过程可以4℃ 1天,-20℃ 一周。

在全血RNA提取试剂直接裂解全血的基础上面,北京艾德莱又进一步简化了操作,增加了离心柱操作,推出了RN23 RNAliquid 超速全血(液体样本)总RNA提取试剂盒。 经过离心柱子吸附漂洗,除了进一步简化了操作步骤外,更适合临床高通量操作外, 还极大的提高了RNA的纯度。除了一般常见的RT PCR 或者荧光定量PCR外,RNA纯度可以满足最严格的实验要求比如基因表达谱芯片要求, 1ml的全血可以得到10μg左右的total RNA,足够满足芯片分析的需要。

下面是北京艾德莱生产的全血RNA提取试剂盒和美国Biochain公司进口产品的对比:

综合以上对比,可以看出艾德莱的全血RNA提取产品比进口的同类产品,在保证RNA高质量可以上芯片和RealTime的基础上,艾德莱的产品起始处理量更大,产量更高,不需要单加苯酚,操作步骤更快速简单,而价格仅仅是进口的四分之一。


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