RNA干扰在人类T细胞的应用

RNA干扰在人类T细胞的应用

在2006年3月24日的Journal  of  Immunological  Methods杂志上，来自费城儿童医院的一个研究组使用RNA干扰技术对人类T细胞进行了操作。这项新的技术进展奖可能使生物学研究人员更广泛地利用RNA干扰。

T细胞是流通于血液中的重要免疫细胞，并且在自身免疫疾病、传染疾病和一些癌症中起到重要作用。之前的一些研究显示，T细胞很难利用RNAi技术进行改造，因为它比其他类型的细胞活动性等大。这种新方法获得的结果可与利用合成小干扰RNA的传统技术想媲美（传统技术非常昂贵）。研究人员希望这种新技术能够成为免疫学研究者提供一种新的工具。

RNA干扰是一种抑制靶标基因活动的过程。近年来，RNA干扰（RNAi）已经成为研究基因在正常生物过程和疾病中如何行使功能。RNAi在细胞中能自然发生，该过程是短小的RNA序列（siRNA）抑制来自特定基因的信号。这种叫做基因沉默的过程能抑制基因制造出它的产物。身体通常利用RNAi过程来抵御敌对病毒的活动。

由Finkel领导的研究组希望能够通过降低成本以及适用范围来使RNAi技术扩展为能够为研究人员广泛使用的一种技术，当然也希望能够用于T细胞的操作。他们的技术联合了三种已有的技术――nucleofection、siRNA表达框架(siRNA  expression  cassettes，SECs)和siRNA表达载体。Nucleofection技术利用专门的溶液和电脉冲临时开启细胞核，以便研究人员将一种DNA插入其中。

这种DNA的序列在进入细胞核后能够编码一种特殊的siRNA。研究人员将这种DNA包裹在一个siRNA表达框架（SEC）中。SEC是一种不昂贵、能快速合成的产品，它携带了遗传序列来调节制造siRNA的基因活动。在检测了一系列SEC的效率后，研究人员将理想的SEC插入到一个载体中。

研究人员通过将一种绿色荧光引入到人类T细胞并利用siRNA来抑制这种基因的表达的方法首次检测了他们的这种技术。

接着，他们将这种方法用于T细胞中的HALP基因。Finkel博士之前发现并命名了HALP基因，并证明这种基因通过帮助受HIV感染的T细胞在免疫系统攻击下存活来在延长HIV感染中起到一定的作用。

利用这种新的联合方式，研究人员成功地敲除了HALP。因为他们之前的研究表明HALP促进潜在的HIV感染，所以这种新技术在HIV治疗方面具有巨大的应用潜力。