常用痛行为学检测实验-痛厌恶情绪的检测方法

主要介绍福尔马林诱导的条件位置回避(formalin induced conditioned place avoidance, F-CPA)。

材料与仪器

步骤

测量装置由穿梭箱和记录系统两部分组成。穿梭箱由三个不透明的室构成。两个较大的室(30cmx30cmx30cm)作为条件室(A室、B室）并排放置，两室之间有10x10cm的门相通。第三个较小的(15cmx20cmx30cm)为中性选择室(C室），置于两个条件室的前方，有两个门(10cmx10cm)分别与A、B室相通。两个条件训练室A和B在视觉、触觉和嗅觉信息上有着显著差异。A室壁上为黑白相间的纵型条纹，底板为粗糙塑料薄板，室内滴1%醋酸溶液作为气味剂。B室壁上为黑白相间的横条纹，底板为光滑的塑料薄板，室内滴1%的桂皮浸液作为气味剂。C室内壁灰色，没有特殊的标记，亦没有特殊气味剂。整个条件训练箱放置于透气性良好的外箱中，外箱顶部两侧装有灯，以保证训练室的光照一致、不受外界干扰及保持恒定，外箱顶部正中装有摄像头，能够随时观察大鼠的活动。自动运动记录系统在A、B两室的底座下面，各有一个称重传感器。当大鼠踏入，传感器将机械能的变化转变为电信号，后者一方面将信号输入一个自动计时器，用以记录大鼠在该室停留的时间，同时，大鼠活动信号采集后输入计算机，用软件记录分析。行为训练共4d。第1天，熟悉环境兼测试。将A、B两室之间的门打开，关闭C室和A、B两条件室之间的门。将大鼠放于C室，2min后打开通向A、B室的门，大鼠自由选择进入A室或B室。之后，将C室与A、B室之间的门关闭，使大鼠可以在A、B两个条件室之间自由活动。计时器将自动记录20min内大鼠分别在两室停留的时间。第2天，将所有门关闭。大鼠不做任何处理，将其随机放入A室或B室自由活动45min,该室称为非条件刺激匹配室(unpaired)。第3天，仍然关闭所有的门，大鼠右后足底皮下注射5%福尔马林50µL后，放入另外一个条件室45min,该室称为条件刺激匹配室(paired)。对照组大鼠足底注射等量的生理盐水。第4天，与第1天一样，测试20min大鼠分别在非条件刺激匹配室(unpaired)与条件刺激匹配室(paired)室内的停留时间。

CPA指标由以下公式计算。CPA index={paired/(paired+unpaired)}xl00%该方法目前运用较广泛，操作简单，结果稳定，是研究急性炎性痛厌恶情绪的主要方法，但不能用于神经病理性痛厌恶情绪的研究。