异构酶的测定实验-D-木糖异构酶微板分析

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液（各自用 20 ul TES 缓冲液作对照）用 96 孔微板 50℃ 放置 15 min，15 min 后加入 0.15 ml 事先按 1:1 混合好的溶液 A 和溶液 B，然后将板在 80℃ 放置 40 min，用微孔板读数仪测 630 nm 处测吸光值。

常见问题

试剂：

0.2 mol/L TES/NaOH，pH 8.0［N-tris（羟甲基）-甲基-2-氨甲基酸，Mr＝229.3；9.2 g 溶于 100 ml 水中，用 1 mol/L NaOH 调节至 pH 8.0，用水加至 200 ml］

0.4 mol/L D-木糖（Mr＝150.1；1.2 g 溶于 20 ml 水中）

0.03 mol/L MnSO4（单水化合物，Mr＝169.0；57 mg 溶于 10 ml 水中）

溶液 A：0.05％ 间苯二酚（Mr＝110.1；50 mg 溶于 100 ml 乙醇）

溶液 B：FeNH4（SO4）2·12H2O（Mr＝482.2）216 mg 溶于 1 L 浓 HCl