脲酶的测定实验-光度计测定法
材料与仪器脲酶磷酸钾 脲 ADP NADH α-酮戊二酸 谷氨酸脱氢酶 脲酶分光光度计步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml
材料与仪器
磷酸钾 脲 ADP NADH α-酮戊二酸 谷氨酸脱氢酶 脲酶
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 实验混合物
0.02 ml 脲酶
25℃、340 nm 处吸收值降低，ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。
常见问题
试剂：0.1 mol/L 磷酸钾，pH 7.6
2.0 mol/L 脲（Mr＝60.0；12 g 溶于 100 ml 0.1 mol/L 磷酸钾，pH 7.6）
25 mmol/L ADP（二钠盐，Mr＝471.2；118 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸钾，pH 7.6）
10 mmol/L NADH（二钠盐，Mr＝709.4；71 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸钾，pH7.6）
0.1 mol/L α-酮戊二酸（单钠盐，Mr＝168.1；168 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸钾，pH 7.6）来源于牛肝脏的谷氨酸脱氢酶（GluDH，500 U/ml 在 0.1 mol/L 磷酸钾中，pH 7.6）
脲酶（大约 1 mg/ml，使用前用 0.1 mol/L 磷酸钾、pH 7.6 溶液稀释至约 0.1 U/ml）
相关文章
