α-葡糖苷的测定实验-测量葡萄糖
材料与仪器己糖激酶三乙醇胺-HCl NaOH D-葡萄糖 ATP MgCl2 NADP 6-磷酸葡萄糖脱氢酶分光光度计步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98
材料与仪器
三乙醇胺-HCl NaOH D-葡萄糖 ATP MgCl2 NADP 6-磷酸葡萄糖脱氢酶
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 的实验混合物
0.01 ml 己糖激酶
25℃ 时，于 340 nm 处吸收值上升。ε340＝6.3×103 l／（mol·cm）。
计算
注意事项
常见问题
试剂：
100 mmol/L 三乙醇胺-HCl/NaOH，pH 7.6（三乙醇胺－HCl，用 NaOH 调节）
1.0 mol/L D-葡萄糖（Mr＝180.2；18 g 溶于 100 ml 水中）
0.1 mol/L ATP（二钠盐，三水合物，Mr＝605.2；605 mg 溶于 10 ml 水中）
0.1 mol/L MgCl2（六水合物，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水中）
0.01 mol/L NADP（二钠盐，Mr＝787.4；79 mg 溶于 10 ml 水中）
6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH，商品为 100～500 U/mg，应该准备约 5U/0.1 ml 的稀释液）
己糖激酶（HK，约 200U/ml）
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