天然培养基配制实验-胶原的配制

胶原是细胞生长良好的基质，它是从动物特定组织中用人工法提取出的，利于组织和细胞的固定，亦属天然培养基。胶原主要用于细胞的附着，能改善细胞表面性质，促细胞生长。胶原可来自大鼠尾腱、豚鼠真皮、牛真皮、牛眼水晶体等，其中以鼠尾胶原最为常用和制备简便，可配制成0.1%—1%的醋酸溶液，

材料与仪器

鼠
酒精 醋酸
离心机 冰箱

步骤

1.  取组织
取体重250 g 左右大白鼠一只，从尾根部切断鼠尾，置75%酒精中浸泡30 分钟；无菌条件下将鼠尾切成1.5 cm 小段，剔除皮毛，抽出尾腱置平皿中； 
2.  溶解
取1.5 g 剪碎尾腱浸入150ml 醋酸溶液（0.01—0.25 M），置4℃冰箱中，并不时摇动，48 小时后，移入灭菌离心管中；
3.  分离
以4000 转/分，离心30 分钟，吸取上清液，10 磅10 分钟高压灭菌后分装入小瓶中，－20℃冰箱保存；
4.  使用方法
用吸管吸少许胶原涂于灭菌培养瓶内壁培养面上，不宜太厚，以倾斜瓶时不流动为准；
5.  向培养瓶内通以氨气后封上瓶盖；
或用浸有氨水的棉球堵塞瓶口（或不用氨气处理，而是置37℃温箱过夜；或置室温48 小时，再用无菌蒸馏水冲洗凉干亦可），作用30 分钟，待胶原凝固，然后用无菌生理盐水冲洗、凉干，即可使用。