急性炎症实验-蟾蜍肠系膜炎症法
简介
蟾蜍肠系膜炎症法是通过解剖蟾蜍肠系膜从而观察炎症和微循环变化。
原理
蟾蜍肠系膜炎症法的基本原理是用盐酸作为一种化学性刺激因素,对蟾蜍肠系膜产生刺激作用,可以引起蟾蜍肠系膜的急性非感染性炎症。
用途
蟾蜍肠系膜炎症法可用于观察急性炎症时微循环的改变,了解微循环各组成部分的结构与血流特点,掌握蛙肠系膜血液循环活体观察技术。
材料与仪器
器材:
孔蛙板、显微镜、常用手术器械、大头针、棉球,1 mL 注射器。
试剂:
① 20% 氨基甲酸乙酯(乌拉坦);
② 0.01 mol/L 盐酸;
③ 任氏液。
步骤
蟾蜍肠系膜炎症法的基本过程可分为如下几步:
A. 取蟾蜍一只,20% 氨基甲酸乙酯(乌拉坦)1~1.5mL/100 g,进行皮下淋巴囊注射,10~15min 后进入麻醉状态。
B. 将蟾蜍腹卧位固定于蛙板上,沿下腹部旁侧剪一长 2~3cm 的切口。
C. 用镊子轻拉出一小段小肠袢,将肠袢展开,用大头针固定铺在有孔的蛙板上(图 7-1)。特别注意要轻轻拉动肠袢,避免术中出血。同时为避免肠系膜干燥,影响血液循环,需经常以 35℃任氏液湿润,但不宜过多。
D. 将有孔蛙板置于显微镜的载物台上,使置有肠系膜的蛙板大孔对准接物镜,在低倍镜下观察血液循环,区别小动脉、小静脉及毛细血管。观察血管口径、血流速度及血流情况,区别轴流(血球层)及边流(血浆层)(图 7-2)。
E. 吸干肠系膜表面任氏液,用 1 mL 注射器在肠系膜上滴几滴 0.01 mol/L 盐酸,继续观察血液循环的变化,观察血管口径、血流速度、轴流边流的界限变化,白细胞的附壁现象(图 7-3)。
注意事项
(1)宜选择稍大些的蟾蜍。
(2)手术操作要仔细,大头针固定肠系膜时避免刺破毛细血管,出血造成视野模糊不清,影响观察效果。
(3)术中牵拉肠系膜时,切忌拉的过紧或撕破肠系膜,以免影响血液循环。
(4)在急性炎症造模前,为防止干燥要经常以任氏液湿润肠系膜。
(5)观察微循环时,要分清小动脉、小静脉及毛细血管。