急性炎症实验-大白鼠急性炎症法

大白鼠急性炎症法的基本原理是当炎症发生时最重要的功能是将炎症细胞输送至炎症病灶，白细胞渗出是炎症反应最重要的特征。白细胞的渗出过程是复杂的连续过程，包括白细胞边集和滚动、黏附和游出、在组织中游走等过程，并在趋化因子的作用下到达炎症灶，在局部发挥重要的防御作用，图解示意见图 7-4。

用途

大白鼠急性炎症法可用于观察急性炎症时的渗出现象。

材料与仪器

器材：

显微镜，10 mL 及 5 mL 注射器各 1 支，常规手术器械一套，细胞计数板，生化分析仪，1 mL EP 管若干，微量移液器。

试剂：

① 20％ 乌拉坦；

② 1％ 角叉菜胶；

③ 生理盐水；

④ 白细胞稀释液（2％ 冰醋酸或 1％ 盐酸，裂解红细胞的作用）。

步骤

大白鼠急性炎症法的基本过程可分为如下几步：

A. 取大白鼠用 20％ 乌拉坦 0.5 mL/100 g 腹腔内注射麻醉。

B. 仰卧位固定后，于剑突右侧 1 cm 处剪毛，实验组将 0.5 mL 的无菌 1％ 角叉菜胶生理盐水注入大鼠右胸腔内，引起角叉菜胶胸膜炎；对照组将 0.5 mL 灭菌生理盐水注入大鼠右胸腔内。

C. 8～12 h后，分别断头处死实验组与对照组动物，打开胸腔，用注射器抽取渗出液，测定液体量，分别观察两组液体颜色、透明度、凝固性。

D. 取一支 EP 管，用微量移液器准确加入 0.38 mL 白细胞稀释液，加入 20 μL 胸腔抽取液，混匀后将稀释液滴入计数室内静置 3 min，显微镜下计数四大格内的白细胞数。计算渗出液中的白细胞，四大格白细胞总数乘以 50，即为每毫升抽取液中的白细胞数。

E. 最后利用生化分析仪测定各组胸腔抽取液中蛋白含量。

注意事项

（1）宜选择稍大些的大白鼠。

（2）手术过程要注意无菌操作，以免对照组右侧胸腔出现炎症。

（3）正确使用微量移液器，移液量要准确无误。

（4）掌握正确的细胞计数方法，做到各组计数准确。