血虚证候动物模型-免疫介导法

免疫介导法，是 BALB/c 小鼠经业致死量照射后，机体的免疫功能严重受损，再输入同基因 H-2，但 MIs 抗原不同的 DBA/2 小鼠的胸腺、淋巴结混合细胞，在宿主体内生存，使宿主体内出现造血抑制细胞和血浆 CFU-GM 抑制活性，从而导致造血干细胞数量明显减少并出现缺陷，使自身复制的速率低于分化率，最终引起全血细胞减少。

原理

免疫介导法的基本原理是机体造血系统病理改变、产生类似临床血虚证候，造成小鼠血虚动物模型。

材料与仪器

动物：BALB/c 小鼠、DBA/2 小鼠。器材：医用手术器械一套。

步骤

免疫介导法的实验步骤如下：A、取 DBA/2 小鼠断领处死，95% 乙醇浸泡消毒 5 分钟后，无菌条件下取出胸腺及颈、腋下、腹股沟淋巴结，加 RIPMI 1640 培养液，除去表面血污及黏附的结缔组织，再次清洗。B、用手术刀、剪刀反复剪切组织，直至成糊状，再轻轻辗碎，用 200 目尼龙网过滤，使之成为单细胞悬液，计数后配成 1 × 106/ml 浓度，其胸腺细胞:淋巴细胞 = 1:2。C、取 1 滴台盼蓝滴入玻片上，鉴定细胞活性应在 95% 以上。BALB/c 小鼠经 X 射线 20 Gy/3 min 亚致死剂量照射后，立即经尾静脉注入上述细胞悬液，每只小鼠 0.2 ml。