细胞传代方法

贴壁生长细胞传代——采用酶消化法传代。常用的消化液是0.25%胰蛋白酶液。

1、将长成单层的细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液（以液面盖住细胞为宜）（我常加1ml），静置5~10分钟。

2、在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变圆，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3~5ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。

3、将细胞悬液吸出2ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。

4、传代细胞培养结果

一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2~4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。