抗肾小球基底膜肾炎动物模型-加速型抗GBM肾炎动物模型

该模型目前使用的较多，常用的是大鼠加速型抗基底膜（CBM）肾炎模型。

原理

采用异体抗肾小球基底膜（CBM）抗体直接注射，诱发肾炎。

用途

用于需要较少抗血清的抗基底膜肾炎的实验研究。

材料与仪器

实验对象：

① SD 大鼠；

② 新西兰白兔。

实验器材：

① 超声粉碎机。

实验试剂：

① 磷酸盐缓冲液（PBS）；

② 弗氏完全佐剂。

步骤

加速型抗GBM肾炎动物模型的基本过程可分为如下几步：

A. 以梯度筛网法获取 SD 大鼠肾小球，经超声粉碎，离心，得到富含 GBM 的沉积物，磷酸盐缓冲液（PBS）调成 10 mg/mL。

B. 取 1 mL GBM 加等量弗氏完全佐剂充分乳化后，于新西兰白兔（2.5 kg）背部多点皮下注射，每两周一次，共 10 次，间接免疫荧光法测定其血清效价在 1:64 以上，含兔 IgG 12~16 g/L，最后一次免疫后第 10天 颈动脉放血取血清，56 ℃，30 分钟灭活补体。

C. 取 SD 大鼠 12 只，体重 150~200 g，将 1 mL（含 1 mg）正常兔 IgG 与等量弗氏完全佐剂充分乳化后，于大鼠背部皮下多点注射进行预免疫，6 天后尾静脉注射兔抗鼠 GBM 血清（1 mL/100 g），置代谢笼留尿，1 天后开始测尿蛋白量，以 24 小时尿蛋白量 ＞ 100 mg/100 g 为模型制作成功。

一般在注射抗血清后 1 天即出现蛋白尿。第 3 天达高峰。1 周后尿蛋白量逐渐减少，1 个月内基本恢复正常。

注意事项：

在大量蛋白尿期间可伴有血肌酐浓度增高，肾脏免疫病理检查可见大量 IgG 沿 GBM 呈连续线状沉积，普通光镜检查可见肾小球有中性粒细胞浸润，系膜区增宽，系膜细胞和内皮细胞增生，基底膜增厚，肾间质可有炎症细胞浸润和纤维化。

注意事项

成功率较高、成膜时间较短，但抗血清少。