眼表及角膜病动物模型-空气携带抗原法诱导变应性结膜炎动物模型

结膜炎（conjunctivitis）是眼科最常见的疾病之一，根据其致病原因可分为微生物性和非微生物性两大类。最常见的是微生物感染（常见的有细菌、病毒和衣原体等，也可见真菌、立克次体和寄生虫等）、物理性刺激（如风沙、烟尘、紫外线等）和化学性损伤（如药品、酸碱或有毒气体等）、免疫性病变（过敏性）、邻近组织的炎症刺激等。变应性结膜炎（allergic conjunctivitis）也称为过敏性结膜炎。它是由眼部组织对变应原产生超敏反应所引起的炎症。实验性变应性结膜炎可通过给大鼠或豚鼠腹腔注射卵白蛋白使其产生 IgE 抗体，该抗体可与结膜组织中肥大细胞的 Fc 受体结合而致敏。还可用豚草粉（ambrosia artemisiaefolia）反复接触豚鼠或小鼠鼻黏膜及结膜，刺激结膜组织产生特异性 IgE 抗体，致附着于结膜的肥大细胞 Fc 受体使之主动过敏。

原理

用豚草粉反复接触豚鼠或小鼠鼻黏膜及结膜，刺激结膜组织产生特异性 IgE 抗体，致附着于结膜的肥大细胞 Fc 受体使之主动过敏。当抗原攻击时，抗原-抗体结合，引起局部肥大细胞脱颗粒释放过敏物质，从而使局部 d 血管的通透性增加，引起结膜充血及水肿，并伴有局部嗜酸性粒细胞浸润。根据结膜充血的程度、嗜酸性粒细胞浸润及肥大细胞脱颗粒程度，判定结膜变态反应程度。

用途

1. 此模型所引起的变应性结膜炎与人眼的枯草热性结膜炎的致病方式和临床表现十分相似，因为：① 所用抗原是最常见的空气携带抗原；② 给药方式是最自然的变应原接触方式；③ 未加佐剂；④ 动物可产生高水平的抗豚草 IgE 及明显的变应性结膜炎的临床和组织学表现。2. 此方法重复性好经济实用、快速、容易操作。

材料与仪器

实验对象：雌性 Hartley 豚鼠或 SWR/J 雌性小鼠。实验试剂：豚草粉。

步骤

空气携带抗原法诱导变应性结膜炎动物模型的基本过程可分为如下几步：A. 选用雌性 Hartley 豚鼠或 SWR/J 雌性小鼠，用 10μl 微量移液管将豚草粉 1.25 mg 喷人动物鼻孔和结膜下穹隆部，每日 1 次，连续 5 天，豚鼠在第 8～12 天再加强 1 次。B. 在第 15 天对豚鼠或第 8 天对小鼠进行抗原攻击，将豚草粉 1.25 mg 喷人结膜下穹隆部。

注意事项

实验室症状观察：抗原攻击 20 分钟后，裂隙灯显微镜下判断结膜充血水肿情况，判断标准同卵白蛋白诱导变应性结膜炎。组织学检查：同卵白蛋白诱导变应性结膜炎。