自然流产动物模型-抗磷脂抗体 (antiphospholipid antibody, APA) 诱导的流产模型

抗磷脂抗体致流产动物模型是指抗磷脂（anti-phospholipid, aPL）抗体是与抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome, APS）有关的一组自身抗体，主要包括抗心磷脂抗体（anti-cardiolipin, ACA）、 抗磷脂酰丝氨酸抗体（antiphosphatidylserine, aPS）、抗磷脂酸抗体（antiphosphatidicacid, aPA）抗磷脂酰 Z 醇胺抗体（antiphosphatidyle-thanolamine, aPE）抗磷脂酰胆碱抗体（antiphos-phatidvlcholine aPC）抗磷脂酰肌醇抗体（antiphos-phatidvlinositol, aPl）和狼疫疮抗凝物（lupus anticoagulant, LA）等。APS 是以反复静脉血栓形成，反复流产和血小板减少为特征的自身免疫性疾病，而大量识别不同磷脂和磷脂结合蛋白的自身 APA 被认为是 APS 的主要致病原因。

材料与仪器

试剂：

各种抗磷脂抗体。

实验动物：

BALB/c、C5a 受体缺陷、C3a 受体缺陷、C5 缺陷小鼠以及其他免疫性小鼠。

步骤

抗磷脂抗体致流产动物模型的基本过程可分为如下几步：

A. 抗体可采用各种抗磷脂抗体。抗体可来源于人和动物，可自制或购买。

（1）人源性抗体: 包含抗磷脂抗体的人 lgG 可从患抗磷脂综合征 [具有高滴度抗磷脂抗体、血栓形成和（或）妊娠流产等特征或复发性流产患者获得。作为对照用的正常人 IgG 可自健无自身免疫疾病者分离获得。

（2）小鼠单克隆 ACA: 可根据需要用不同抗原免疫小鼠后进行制备。抗体制备方法参考其他相关文献。

B. 动物可根据研究需要选择不同小鼠品系，如 BALB/c、C5a 受体缺陷、C3a 受体缺陷、C5 缺陷小鼠以及其他免疫性小鼠等。

C. 建模方法。成年小鼠，雌雄交配获得妊娠，于妊娠 d8～12 接受腹腔内注射 ACA，一般选择其中两天各注射一次（如 8 天、10 天或 8 天、12 天），注射的抗体量根据研究目的和抗体的不同而异。如人 aPL-IgG 10 mg、鼠单克隆抗体 1 mg、鼠抗人纤溶酶抗体 50 μg 等。建模后继续妊娠一定时间，将小鼠处死，切除子宫，计算死胎数，称量胎鼠和胎盘重量等。

注意事项

来自复发性流产妇女的 lgG 和抗磷脂抗体可引|起小鼠发生 40% 的胎儿吸收，且存活胎儿体重平均减少 35%。而接受健康个体 lgG 处理的小鼠胎儿吸收小于 10%。