胎儿宫内生长迟缓动物模型-子宫动脉结扎法
简介
子宫动脉结扎法是通过直接减少子宫胎盘血流灌注,造成胎儿慢性缺血缺氧来影响胎儿生长发育。
用途
可广泛应用于 IUGR 相关研究。由于子宫的血供被急剧而完全地中断,导致胎儿急性缺氧,容易发生流产、产或胎死宫内。
材料与仪器
试剂:甲氧氟烷。
实验动物:
健康清洁级成年雌性 SD 大鼠,无交配史,体重 240~280 g。
步骤
子宫动脉结扎法的基本过程可分为如下几步:
A. 动物准备。健康清洁级成年雌性 SD 大鼠,无交配史,体重 240~280 g,在清洁级动物室内标准状态下饲养,室温 23 ℃,环境通风清洁,提供足大鼠饲料及无菌水,保持每日 12 小时灯照与 12 小时黑暗交替。雌鼠与成年雄性大鼠按 1:1 或 2:1 合笼交配过夜,第 2 日查见阴栓定为妊娠第 1 天。
B. 方法
(1)SD 大鼠在妊娠 17 天用甲氧氟烷吸入麻醉,于下腹正中线切开腹壁,暴露两侧子宫角,胎仔用温盐水热浴。将消毒 3 - 0 钢丝线平行放置于一侧子宫动脉的中部,用 3-0 丝线将该动脉连同钢丝一起结扎,然后将钢丝线轻轻抽出,造成不完全动脉闭塞,手术后所有动物肌注 1 5 万 U 的青霉素。于妊娠 d21 杀死动物,剖腹取出胎仔和胎盘,洗去血液和羊水,称量胎仔、胎盘及胎仔肝脑重量。
(2)经典 Wigglesworth 子宫动脉结扎法: 妊娠 d17~19 麻醉动物,于下腹正中开腹,暴露出双角子宫供应子宫、卵巢的动静脉,以动脉夹钳夹右侧动静脉,造成右侧宫角内胎鼠完全缺血缺氧,子宫右侧内的胎鼠为 IUGR 组,左侧不钳夹保持血液供应,作为对照组(假手术组),30 分钟后取下血管钳,恢复血供(颜色转红))后还纳子宫于正常解剖位置,然后关腹。
(3)卵巢动脉结扎法:孕鼠在妊娠 15 天进行手术。麻醉后取腹部纵行切口长约 5 cm,依次切开腹壁各层进入腹腔,暴露并探香双侧子宫,用微动脉夹阻断一侧(实验侧)卵巢动脉血供,20~40 分钟恢复血流,并逐层关腹。
(4)双侧子宫动脉结扎法:-般于孕 19 天进行手术。将孕鼠麻醉后,同上述方法暴露卵巢动脉,行双侧子宫动脉结扎。
注意事项
该法比较接近人类胎儿生长受限发生的病理生理,而目由于大鼠的子宫是双角子宫,通过子宫动脉结扎法可设自体对照。