庆大霉素肾病动物模型

庆大霉素是一种氨基糖苷类抗生素，广泛应用于革兰阴性细菌感染的治疗。但是，庆大霉素的肾毒性（能导致急性肾小管坏死或急性肾衰竭）导致其应用受到限制。庆大霉素肾毒性的发生率是 10%~20%。庆大霉素肾损伤的发生机制还不很清楚，因此，建立庆大霉素肾损伤动物模型 (animal models of gentamicinnephropathy)，对于刚明其损伤机制及探讨防治措施具有重要的理论与实际意义。

原理

研究表明，内质网应激、凋亡、溶酶体酶释放、细胞能量状态受损、氧化应激和 CaSR（细胞膜 C 蛋白偶联受体家族成员）可能与庆大霉素肾毒性发生密切相关。其病理特征主要表现为庆大霉素对肾小管的影响，包括上皮细胞刷状缘消失，肾小管坏死，小管上皮水肿和上皮细胞脱落。

用途

可应用庆大霉素肾损伤动物模型阐明其导致急性肾损伤的发生机制，探讨有效的干预治疗措施，探索合理的用药方法。

材料与仪器

实验对象：

① 大鼠。

实验试剂：

① 4% 甲醛溶液；

② 硫酸庆大霉素。

步骤

庆大霉素肾病动物模型的基本过程可分为如下几步：

A. 庆大霉素肾海性大鼠模型的造模方法。清洁级 Wistar 大鼠，体重 250-350 g，分为实验组与对照组。实验组大鼠每天 1 次腹腔注射硫酸庆大霉素，剂量为 80~100 mg/kg , 连续注射 7~10 天。对照组则注射等量生理无菌盐水。然后分别留取血、24 小时尿，用全自动生化分析仪测定血肌酐、血尿素氢、血钾、血钠、尿肌卓、尿钠及 24 小时尿蛋白。留取肾脏标本用 4% 甲醛溶液固定，石蜡包埋，后连续切片，常规 HE 与 PAS 染色，在光学显微镜下观察肾脏组织病理改变。

B. 庆大霉素肾毒性小型猪模型的造模方法 6 月龄雄性小型猪，体重 6~8 kg。随机分为 2 组。正常对照组，每日肌注生理盐水 1 mL，共 10 天。庆大霉素组，每日 1 次，肌注硫酸庆大霉素，剂量为 80 mg/kg，连续注射 10 天。实验第 10 天注射结束后留取血、尿标本测定肌酐、尿素氮等生化指标；取肾标本用 4% 甲醛溶液固定，分别做 HE、PAS 等染色分析，光学显微镜下检查病理变化。

注意事项

1. 庆大霉素肾毒性大鼠模型。与对照组相比，庆大霉素模型组大鼠血肌酐和尿素氮显著升高，血钾水平显著升高。病理表现：肾皮质肾小管广泛坏死，肾小管上皮脱落，肾小管上皮空泡化，肾小管萎缩，间质凝症和水肿，近端和远端肾小管退化或扩张。

2. 庆大霉素肾毒性小型猪模型。与正常对照组相比，庆大霉索模型组血尿素氮，肌酐和血钾显著升高。病理表现：在模型组中，小型猪肾组织出现广泛损伤，主要表现为肾小管坏死，肾小管上皮水肿和上皮细胞脱落，管腔内充满红色颗粒状坏死物。