多囊卵巢综合征动物模型-雄激素造模法
简介
雄激素造模法是通过外源性补充过量雄激素或雄激素前体,抑制卵泡成熟,使卵巢内小卵泡可发育至一定时期,但无优势卵泡形成,从而导致卵巢多囊样改变。
用途
采用雄激素联合胰岛素造模,使模型在性激素水平上更符合人 PCOS 的病变特征,还能够更有效地构建出胰岛素抵抗的病理改变。
材料与仪器
试剂:
① 丙酸睾酮;
② 脱氢表雄酮(DHEA);
③ 硫酸普拉睾酮钠。
实验动物:
① 出生后 7 天雌性小鼠;
② 出生 23 天雌性大鼠。
步骤
雄激素造模法的基本过程可分为如下几步:
A. 丙酸睾酮造模法。
① 出生后 7 天雌性小鼠,颈背部皮下注射丙酸睾酮 1 mg,8 周后连续阴道涂片检查 2 个动情周期,以阴道上皮持续角化者作为造模成功;
② 出生后 9 天雌性大鼠,颈背部皮下注射丙酸睾酮 1.25 mg,60 天后连续阴道涂片检查 11 天,以阴道上皮持续角化者作为造模成功。
B. 脱氢表雄酮造模法。
① 出生 23 天雌性大鼠,皮下注射溶解于油剂的脱氢表雄酮(DHEA)6 mg/(100 undefinedd) 连续 20 天,停药后动物卵巢病理改变及血内分泌改变与 PCOS 患者相似,并出现明显的高胰岛素血症;
② 出生 16 周雌性大鼠,皮下注射 DHEA 5~20 mg/(100 undefinedd) 连续 14 天,停药后动物体内孕烯醇酮的改变与 PCOS 患者相似。
C. 硫酸普拉睾酮钠造模法。出生 23 天雌性大鼠每日皮下注射硫酸普拉睾酮钠 9 mg/(100 undefinedd),连续 20 天。
注意事项
雄激素造模法的不足之处是无人 PCOS 表现的卵巢白膜增厚及体积增大,相反其体积和重量只有正常的 1/2;在激素改变方面模型鼠血中促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)不增加反而减少,对 FSH 和卵巢楔形切除术亦不敏感。