耳鸣动物模型建模实验
简介
耳鸣研究也需要动物模型,但以往的耳鸣研究多局限于人类,这大大限制了对耳鸣机制的深入了解。动物不可能用语言表达其主观感觉,人与动物无法用语言来交流,所以只有通过观察动物的某种行为反应或生理反应,才能确定动物是否感觉到了耳鸣。
原理
耳鸣动物模型建模实验的基本原理多是巴甫洛夫条件反射原理。水杨酸可以导致耳鸣及听力下降,而且这种现象是可逆的,停药后耳鸣消失,听力也恢复。所以,许多学者用水杨酸作为动物造模的药物。
用途
耳鸣动物模型建模实验可用于一般用于耳鸣基础研究。
材料与仪器
器材:
55 dB SPL 白噪声、自动计数器等。
步骤
耳鸣动物模型建模实验的基本过程可分为如下几步:
A.目前只有用豚鼠、大鼠建立耳鸣动物模型的报道,其他动物尚未见文献报道。实际上,犬、猫、小鼠等也能够用作实验动物。特别容易惊恐的动物不适合行为学实验。
B.条件反射训练在另一间隔声室里进行,每只动物每天训练 1 次,每次 30 分钟。条件刺激是背景声音(55 dB SPL 白噪声)的随机停止,共呈现 5 次,分别在第 3、9、17、24、29 分钟左右出现,每次 30 秒。非条件刺激是电击,1.5 mA,持续 0.5 秒,在条件刺激出现时的第 9 秒、18 秒或 27 秒给予一次即可。
C.训练时给动物供水,按 7~10 滴/分将供水量控制在 15~20 mL。用自动计数器记录吸水次数。条件刺激出现时的吸水次数为 B,条件刺激不出现时每 30 秒的平均吸水次数为 A,吸水率 R=B/(A+B)。
D.训练分 3 个阶段 ①适应训练期:目的是让动物适应条件刺激并持续吸水,吸水率应该等于或接近 0.5,动物吸水次数一般为 6000~8000 次,如果少于 350 次则被淘汰;②条件反射训练期:条件刺激出现时给予电击,动物因恐惧电击而减少或停止吸水,吸水率应等于或接近 0;经 2~3 天强化训练后,动物建立了「背景噪声停止-吸水率下降或停止」的条件反射;③条件反射消除期:条件刺激出现时不再给予电击,观察条件反射的消除或遗忘时间,吸水率逐渐恢复到 0.5。
E.然后按照 250 mg/kg 或者 350 mg/kg 的剂量皮下注射水杨酸钠,诱发大鼠产生耳鸣(图 9-13-15,图 9-13-16 及图 9-13-17)。