支气管哮喘动物模型建模实验-卵白蛋白诱发法构建支气管哮喘动物模型(支气管哮喘动物模型建模实验)
简介卵白蛋白激发豚鼠哮喘发作是目前国内外常用的方法,其方法简单,可复制性强,且豚鼠是最好的显示气道高反应型的特征动物,其哮喘发作与人的表现相似。原理卵白蛋白诱发
简介
卵白蛋白激发豚鼠哮喘发作是目前国内外常用的方法,其方法简单,可复制性强,且豚鼠是最好的显示气道高反应型的特征动物,其哮喘发作与人的表现相似。
原理
卵白蛋白诱发法构建支气管哮喘动物模型的基本原理是当致敏原-卵白蛋白注入豚鼠体内,其可溶性抗原成分刺激机体产生特异性免疫素(IgE 抗体),使机体处于致敏状态。
当豚鼠再次接触到此抗原时,由 1 gE 介导发生抗原抗体反应,使细胞脱颗粒,释放出活性化学物质如组胺、嗜酸性粒细胞趋化因子等,作用于支气管,引起气道高反应致哮喘。
材料与仪器
器材:
① 超声雾化吸入器;
② 雄性豚鼠等。
试剂:
① 生理盐水溶液(含 10% 卵白蛋白)。
步骤
卵白蛋白诱发法构建支气管哮喘动物模型的基本过程可分为如下几步:
A. 选用健康雄性豚鼠,体重 300~500 g,腹腔注射 10% 卵白蛋白生理盐水溶液 10 mL,使豚鼠处于致敏状态。
B. 2 周后以 10% 的卵白蛋白生理盐水溶液雾化吸入 20 分钟,诱发豚鼠哮喘发作。亦可用选用 200~300 g 的豚鼠,雌雄不限,于第 1 天和第 8 天将 0.5% 卵白蛋白(溶于生理盐水)10 mL 加至超声雾化吸入器,给豚鼠用简易面罩雾化吸入 10 分钟。
C. 第 16~20 天将致敏的豚鼠置于密闭的容器内,用 1% 卵白蛋白气雾激发,使动物暴露在卵白蛋白气雾中 10~30 分钟,直至出现哮喘样发作为止。豚鼠可出现气喘表现,咳嗽、烦躁、口唇和四肢发绀,呼吸费力挣扎,呼吸频率明显增快。用 II 导生理记录仪可描记其呼吸曲线,出现呼吸频率加快和呼吸加深。病理检查可发现毛细血管扩张,嗜酸性粒细胞浸润,腺体分泌活动亢进。