Login
欢迎浏览恩派尔生物资料网
我要投稿 请登录 免费注册 安全退出

您现在的位置是: 首页 > 实验方法 > 动植物

动植物

阿尔茨海默病其他动物模型-大鼠侧脑室注入β-淀粉样蛋白(Aβ)模型

2024-12-19 动植物 加入收藏
简介大鼠侧脑室注入 β-淀粉样蛋白(Aβ)模型是将β-淀粉样蛋白不同的片段 Aβ1-42 或 Aβ1-40 注入脑室或海马等部位,大鼠出现学习和记忆功能损害,海

简介

大鼠侧脑室注入 β-淀粉样蛋白(Aβ)模型是将β-淀粉样蛋白不同的片段 Aβ1-42 或 Aβ1-40 注入脑室或海马等部位,大鼠出现学习和记忆功能损害,海马神经元坏死或缺失凋亡相关基因表达增加。

用途

研究 AD 的病理发生发展过程及药物研发。

材料与仪器

器材:

① 常用手术器械

② 缝合线

③ 立体定向仪

试剂:

① Aβ1-40

② 0.4% 戊巴比妥钠

③ 青霉素

步骤

1、Aβ1-40 寡聚化处理

注射前,将 Aβ1-40 配置在灭菌 PBS 溶液中(浓度为 10μg/μL),并在 37 ℃ 恒温箱中孵育一周诱导寡聚化,放置冰上备用。

2、AD 模型制备

A. 大鼠经腹腔注射 0.4% 戊巴比妥钠(0.2mL/10 g)麻醉,后固定于立体定向仪上。

B. 纵行切开头皮,双侧脑室置管坐标为前囟 0.8mm,中线旁 1.1mm,硬膜下 3.6mm。

C. 分别向一侧侧脑室缓慢注入 5μL 新鲜配制的 40pmol/μL 的 Aβ1-40,全脑共约 400pmol,注入速度约为 1μL/min,每次注射间隔 2 小时。

D. 留针 2 分钟后拔管,骨蜡封闭颅骨孔后缝合切口。

E. 注射过程中,出血量较大的动物判定为失败,排除在实验之外。

常见问题

① 该模型的缺点在于 β-淀粉样蛋白本身对脑组织存在局灶性损伤,且存在 β-淀粉样蛋白局部聚集的情况,目前有报道利用微泵微灌注,可较为有效地解决局部聚集情况。

② 用颅骨钻开颅时,注意颅骨表面的筋膜是否处理干净,否则会损伤脑组织和表皮,并注意颅钻深度。

③ 侧脑室注射时一定要严格遵守进针/退针的深度及停针时间,并在推注过程中一定要遵循匀速缓慢原则,否则可能导致动物死亡。

④ 术后腹腔注射青霉素预防感染,45° 进针后回抽,见空气后方可进行注射。若出现血性或其他液体(可能是尿液),则退针重新进行注射。

文章底部广告位

文章评论

加载中~