小鼠气道哮喘模型的建立及分析实验-气道应答性分析实验

器材：

非侵入性全身体积测量描记仪（model PLY 3211，Buxco Electronics，Troy，NY）。

试剂：

①醋甲胆碱

步骤

气道应答性分析实验的基本过程可分为如下几步：

A 在对小鼠进行最后一次气雾剂刺激的当天，使用非侵入性全身体积测量描记仪对小鼠的气道应答性进行测定，全身体积测量描记仪如图 8-4-1 所示。肺的呼吸功能用全身体积测量描记仪来测量，在这个仪器中将小鼠放在器皿中，可以根据他们呼吸产生的压力波测定呼吸参数。

B 呼吸道阻力一般用 Penh 来表示，在一个完整的呼吸波中，Ti 代表呼气时间，Tr 代表松弛时间，PEP＝最大呼吸流量（ml/s），PIP＝最大吸气量（ml/s），小鼠呼吸道阻力的计算公式为 Penh ＝［（Te/Tf）-1］x（PEP/PIP），如图 8-4-2 所示。在一个完整的呼吸波中，Te 代表呼出气体时间，TF 代表松弛时间，也就是呼气时压强衰退到整个呼气压 36% 时的时间，一般用 Penh 来表示呼吸阻力，当加入 MCh 诱导气道平滑肌收缩后，由于气道变细使得呼吸阻力增大，相应的 Penh 就会增加。

C 小鼠在雾化的生理盐水中 2 分钟后，基础的呼吸道阻力通过随后 3 分钟的测量测出。随后不断梯度增加雾化的醋甲胆碱浓度（3.125 mg/ml，6.25 mg/ml，12.5 mg/ml，25 mg/ml，50 mg/ml 和 100 mg/ml），每一个醋甲胆碱浓度对应的呼吸道阻力都通过为时 3 分钟的测量得出。结果用每一浓度的醋甲胆碱引起的呼吸道阻力增加的百分数来表示。图 8-4-3 为对 MLCK 基因敲除小鼠诱导的哮喘模型的分析结果。