雄性小鼠生育力检测实验-睾丸组织细胞形态学检测实验

睾丸组织形态学检测主要包括 HE 染色观察精子发生状况和 Johnson 评分评价睾丸切片精子发生情况。

材料与仪器

器材：

① 石蜡包埋机

② HE 染色体系。

试剂：

① Bouin 液。

步骤

睾丸组织形态学检测实验的基本过程可分为如下几步：

A 新鲜分离出成年雄性 12 周龄实验组和对照组小鼠的睾丸组织，Bouin 液固定 24 小时。

B 常规上行梯度乙醇脱水、石蜡包埋，切取厚度为 5 μm 的组织切片。

C 常规 HE 染色，首先观察雄性小鼠精子发生状况，利用 Johnson 评分评价睾丸切片精子发生情况，评分标准如下：

1 分，曲细精管内无细胞

2 分，仅有支持细胞

3 分，仅有精原细胞

4 分，5 个精母细胞／曲细精管

5 分，许多精母细胞

6 分，5 个精细胞／曲细精管

7 分，许多精细胞，但无分化

8 分，有晚期精细胞

9 分，5 个精子／曲细精管

10 分，许多精子

D 实验完毕后，用 SPSS13.0 软件分析实验结果。

此外，需要仔细观察 HE 睾丸组织切片以发现异常的精子发生情况。附正常的睾丸组织 HE 精子发生切片图（图 8-6-9）。

注意事项

1 睾丸组织形态学检测一般选用 12 周龄雄性小鼠，实验组和对照组各 12 只。如果需要观测精子发生的连续性，则需要选择鼠龄为 6 周龄、9 周龄、12 周龄、15 周龄、18 周龄、21 周龄。