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DNA实验

物理显影液的配制

2024-09-29 DNA实验 加入收藏
(一)硝酸银显影液①1%明胶60mi.②柠檬酸缓冲液10ml,pH3.4(柠檬酸2.55g,柠檬酸钠2.35g,加水至10m1)。③对苯二酚1~1.7g,加水至

(一)硝酸银显影液

①1%明胶60mi.

②柠檬酸缓冲液10ml,pH3.4(柠檬酸2.55g,柠檬酸钠2.35g,加水至10m1)。

③对苯二酚1~1.7g,加水至30ml.

④硝酸银50~100mg,加水至2ml.

用前①~③液混合过滤,最后加入④液。

(二)乳酸银显影液

①10%一20%阿拉伯树胶60ml.

②柠檬酸缓冲液10ml(配法同上)。

③对苯二酚0.85g,加水至15mi.

④乳酸银110mg,加水至15ml.

以上①~③液用前混合过滤,最后加入④液。

(三)醋酸银显影液

①100mg醋酸银溶解在50ml三重蒸馏水中,用前1h配制,并充分搅拌。

②10%明胶10ml.

③pH3.5~3.8柠檬酸盐缓冲液40ml(内含600mg对苯二酚)。

用前分别将②、③两液过滤混合,然后加入50ml醋酸银液搅拌混匀。

(四)彩色显影剂的配制

A液:二乙基对苯二胺硫酸盐(TSS)200mg,无水碳酸钠2g,溴化钾100mg,无水亚硫酸钠200mg,加蒸馏水至90ml搅拌溶解。

B液:α-萘酚200mg,加异丙醇10ml,或对硝基苯乙腈(碱性品红)200mg溶于10ml丙酮中。临用前A、B两液混合,过滤后在室温下即可显色。

(五)漂白液的配制

在10ml蒸馏水中加入10g铁氰化钾和5g溴化钾。

(六)定影液的配制

铁氰化钾5g、溴化钾2.5g、硫代硫酸钠3g依次加入到95ml蒸馏水中,最终加水至100ml.

(七)缓冲液

缓冲液Ⅰ:0.02mol/L(pH7.4)TBS(内含0.1%Triton X-100,0.1%BSA,0.01%NaN3)。

缓冲液Ⅱ:0.05mol/L(pH8.2)TBS(内含0.1%BSA,0.01%NaN3)。


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