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DNA实验

油红染色法

2024-05-25 DNA实验 加入收藏
油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。 试剂配制:油红O 0.5g异丙醇(含量98%) 10

油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。 

试剂配制:

油红O                 0.5g

异丙醇(含量98%)     100ml

此为油红饱和液,可长期保存备用。

 

染色步骤:

1)  冻切片

2)  蒸馏水充分洗涤。

3)  油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:

4)  取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。

5)  60%乙醇镜下分化至间质清晰。

6)  水洗。

7)  Marry氏苏木素复染核。

(8)  水洗。

9)  甘油或甘油明胶封片。

结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。

注意事项: 油红染色时应避免试剂挥发过多,否则易形成背景沉淀。60%乙醇分化,应于镜下控制至脂肪组织呈鲜红色,间质无色时为度。


油红O染色法(Oil Red O Method for Lipofuchsin)

适用于中性脂肪染色。染色结果:中性脂肪呈红色 ,胞核蓝色。

方法步骤:

1 冰冻切片,厚约6-10UM,蒸馏水稍洗。
2 用钩把切片捞入60%异丙醇中漂洗20-30秒钟。
3.取贮备液6ML ,加蒸馏水4ML,混合后静置10分钟,即可用来染色。油红O染时间5-10分钟。
4 60%
异丙醇稍洗去多余染液,蒸馏水洗。
5 Mayer苏木素浅染核
6 1%盐酸酒精分化。
7 水漂洗10分钟或于稀碳酸锂水溶液中促蓝,裱于玻片,把周围水分抹干。

8 封片剂封片。

注意事项:
1 用于脂肪易溶于有机溶剂,所以显示脂肪一般不能象石蜡切片一样处理,而通过冰冻切片染色来显示。
2 作脂肪染色的冰冻切片不能太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。

3 Mayer苏木素复染时间不能过长。
4 染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。



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