油红染色法
油红作为脂肪染色剂,其染色步骤简便,染色结果肯定,并且优于苏丹Ⅳ。
试剂配制:
油红O 0.5g
异丙醇(含量98%) 100ml
此为油红饱和液,可长期保存备用。
染色步骤:
(1) 冻切片
(2) 蒸馏水充分洗涤。
(3) 油红稀释液染10-15分钟,避光、密封。油红稀释液的配制:
(4) 取油红饱和液6毫升,加蒸馏水4毫升,静置5-10分钟后过滤后使用。
(5) 60%乙醇镜下分化至间质清晰。
(6) 水洗。
(7) Marry氏苏木素复染核。
(8) 水洗。
(9) 甘油或甘油明胶封片。
结果:脂肪呈鲜红色,细胞核呈蓝色,间质无色。
注意事项: 油红染色时应避免试剂挥发过多,否则易形成背景沉淀。60%乙醇分化,应于镜下控制至脂肪组织呈鲜红色,间质无色时为度。
油红O染色法(Oil Red O Method for Lipofuchsin)
适用于中性脂肪染色。染色结果:中性脂肪呈红色 ,胞核蓝色。
方法步骤:
1 冰冻切片,厚约6-10UM,蒸馏水稍洗。
2 用钩把切片捞入60%异丙醇中漂洗20-30秒钟。
3.取贮备液6ML ,加蒸馏水4ML,混合后静置10分钟,即可用来染色。油红O染时间5-10分钟。
4 60%异丙醇稍洗去多余染液,蒸馏水洗。
5 Mayer苏木素浅染核
6 1%盐酸酒精分化。
7 水漂洗10分钟或于稀碳酸锂水溶液中促蓝,裱于玻片,把周围水分抹干。
8 封片剂封片。
注意事项:
1 用于脂肪易溶于有机溶剂,所以显示脂肪一般不能象石蜡切片一样处理,而通过冰冻切片染色来显示。
2 作脂肪染色的冰冻切片不能太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
3 Mayer苏木素复染时间不能过长。
4 染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。