实时荧光定量 PCR（Quantitative Real-time PCR）是一项以 PCR 反应为基础的 DNA 定量技术，通过对目标基因在扩增过程中产生的拷贝数进行实时的定量，从而达到对目的基因的定性和定量分析。现有两种常用的方法对 PCR 产物进行荧光定量：一种是利用荧光染料与双链 DNA 结合，通过荧光强度进行定量；另一种是利用携带了荧光报告基团的特异DNA 探针对目标基因进行定量。

一、利用荧光染料进行定量

一种最为常用的定量方法就是在 PCR 反应体系中加入荧光染料，此类荧光染料会与所有的双链 DNA 结合，并产生荧光。游离的荧光分子不会产生荧光信号，只有与双链 DNA 结合的荧光分子才会释放荧光，随着 DNA 拷贝数的增加，测得的荧光强度也会增强。