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    电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备

    材料和试剂1. 恒温旋转式摇床2. 三角烧瓶(容量为1或2L)3. 50ml灭菌离心管4. 低温高速离心机5. SB培养基细菌培养用胰化蛋白胨 20g细菌培养用

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    转化子DNA的快速鉴定法

    快速细胞破碎法实验步骤1、 挑取转化平板上的单菌接种于含相应抗生素的2ml LB中,37℃振荡培养至A590值为0.6~0.8。2、 取1ml菌液至1.5ml

  • 制备高效率感受态的方法

    制备高效率感受态的方法

    有人提出, 冻存后转化效率降低且这种方法不适合大质粒.以下转贴为coli感受态细胞制备方法,具体方法请最好查阅文献.摘要:但有人提出, 冻存后转化效率降低, 且

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    几种常用转化细胞和转化技术

    介绍几种常用转化细胞和转化技术致癌化学物转化细胞:转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验实验步骤:1、取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎

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    1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源

  • 基因转染实验(DEAE-葡聚糖转染法)

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    DEAE-葡聚糖介导的转染,其原理还不清楚,可能是通过内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核,此法只适合暂时转染实验,转染效率与DEAE-葡聚糖浓度以及细胞与 DN

  • 电转化法制备大肠杆菌感受态细胞

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    1.前夜接种受体菌(DH5α或 DH10B),挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜;2.取 2ml过夜培养物转接于200ml LB培养基中,在37℃摇床上

  • 基因转染和实验设计原则

    基因转染和实验设计原则

    摘要: 核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,基因转导的频率大约为10

  • 用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌

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    摘要: 本文主要介绍了用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌的实验方法.下面的方法是对Cohen等于1972年发表的方法更为便捷的修改.下面的方法是对Cohen等于1

  • 重组子的筛选

    重组子的筛选

    根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前

  • 克隆/建库/表达专用超级高效感受态细胞

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    国外的同学说一般他们克隆都是直接购买感受态细胞转化,实验效率很高的。我总是 以为如果是一般的克隆实验,自己做感受态好像够用了--如果是建库,购买现成的感受态细胞

  • 一步法制备感受态细胞

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    一、操作步骤:1. 涂平板:为取得最佳的感受态效率,必须先把甘油菌或其它形式保存的菌种涂LB平板,并培养过夜。2. 接种:取一有新鲜培养的菌种的LB平板,后续操

  • 腺病毒介导EGFP基因转染神经干细胞

    腺病毒介导EGFP基因转染神经干细胞

    摘要: 本实验从新生SD大鼠海马组织中分离神经干细胞,并通过观察携带EGFP基因的腺病毒(Ad/ EGFP)转染NSCS后EGFP表达规律及转染对NSCS的活力

  • 用氯化钙制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞

    用氯化钙制备新鲜的大肠杆菌感受态细胞

    下面的简单方案是Clhen等(1972)所用方法的变通方案,常用于成批制备感受态细菌,这些细菌可使每微克螺旋质粒DNA产生 5x106-2x107个转化菌落,这

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    重组质粒的筛选与鉴定

    摘要: 可以在蛋白质水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子。可以在 蛋白质 水平和目的基因功能水平等各个层次鉴定重组子.基因水平的鉴定有酶切鉴定、 PCR