-
高效感受态细胞制作
方法一[试剂准备]A液: 1M , MnCl2 :B液: 1M , HEPES , pH=6.2-6.8 ,用无菌水配,配后不需灭菌;C液 称取 CaCl2 0
-
转染实验常用的报告基因(植物、动物)
报告基因(reporter gene)是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合
-
如何选择进口高压灭菌器
进口高压灭菌器因其使用的安全性和自动化程序高,深受实验室用户的喜爱。那么,怎么才能买到称心如意的产品呢?怎样区分哪些产品是原装进口?哪些是国内组装产品呢?下面将
-
RbCl超级感受态细胞
一、材料与试剂1. SOBor2xYT2. MES3. 足够80个管子的TFB(50 mL)/400转化DMSO4. 5 M NaCl二、仪器1. 离心机三、步
-
电穿孔转化感受态E.coli TG1细胞的制备
材料和试剂1. 恒温旋转式摇床2. 三角烧瓶(容量为1或2L)3. 50ml灭菌离心管4. 低温高速离心机5. SB培养基细菌培养用胰化蛋白胨 20g细菌培养用
-
转化子DNA的快速鉴定法
快速细胞破碎法实验步骤1、 挑取转化平板上的单菌接种于含相应抗生素的2ml LB中,37℃振荡培养至A590值为0.6~0.8。2、 取1ml菌液至1.5ml
-
制备高效率感受态的方法
有人提出, 冻存后转化效率降低且这种方法不适合大质粒.以下转贴为coli感受态细胞制备方法,具体方法请最好查阅文献.摘要:但有人提出, 冻存后转化效率降低, 且
-
几种常用转化细胞和转化技术
介绍几种常用转化细胞和转化技术致癌化学物转化细胞:转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验实验步骤:1、取材:妊娠后第13天取材,取数个同窝胚胎,去头和内脏,在无菌条件下剪碎
-
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源
-
基因转染实验(DEAE-葡聚糖转染法)
DEAE-葡聚糖介导的转染,其原理还不清楚,可能是通过内吞噬作用而使DNA转导进入细胞核,此法只适合暂时转染实验,转染效率与DEAE-葡聚糖浓度以及细胞与 DN
-
电转化法制备大肠杆菌感受态细胞
1.前夜接种受体菌(DH5α或 DH10B),挑取单菌落于LB培养基中37℃摇床培养过夜;2.取 2ml过夜培养物转接于200ml LB培养基中,在37℃摇床上
-
基因转染和实验设计原则
摘要: 核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形式出现时,可使DNA附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,基因转导的频率大约为10
-
用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌
摘要: 本文主要介绍了用氯化钙制备和转化感受态大肠杆菌的实验方法.下面的方法是对Cohen等于1972年发表的方法更为便捷的修改.下面的方法是对Cohen等于1
-
重组子的筛选
根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前
-
克隆/建库/表达专用超级高效感受态细胞
国外的同学说一般他们克隆都是直接购买感受态细胞转化,实验效率很高的。我总是 以为如果是一般的克隆实验,自己做感受态好像够用了--如果是建库,购买现成的感受态细胞