-
可溶性产物的纯化(融合T7·Tag的表达蛋白)
大肠杆菌表达蛋白以可溶和不溶两种形式存在,需要不同的纯化策略。现在,许多蛋白质正在被发现而事先并不知道它们的功能,这些自然需要将蛋白质分离出来后,进行进一步的研
-
直击膜蛋白分析全过程——从表达,纯化到结构分析
大约 30% 基因编码 MPs,膜蛋白占到新药物~50%的靶点。但MP’s 很难被成功表达,在成功解析出结构的蛋白中,只有<1%是膜蛋白。直击膜蛋白分析全
-
蛋白质的提取和纯化--选择分离材料及预处理
蛋白质的提取和纯化--选择分离材料及预处理以蛋白质和结构与功能为基础,从分子水平上认识生命现象,已经成为现代生物学发展的主要方向,研究蛋白质,首先要得到高度纯化
-
蛋白质提取与制备的原理和方法
蛋白质提取与制备蛋白质种类很多,性质上的差异很大,既或是同类蛋白质,因选用材料不同,使用方法差别也很大,且又处于不同的体系中,因此不可能有一个固定的程序适用各类
-
蛋白质抽取
蛋白质在细菌中表现后,以反复的冷冻-解冻方法打破细胞,再用硫酸铵把蛋白质沉淀下来,此步骤可以去除大部份核酸、多醣、脂质等杂物。仪器用具:恒温震荡培养箱37℃;高
-
提高超滤收率方法
当需要较高的收率时,尤其当研究的样品对象在微克范围时,建议应考虑以下几点:1.根据样品处理量,选择最小可用的超滤容器,在小容器中反复添加样品,反复超滤。2.在适
-
蛋白质结构解析的方法简介
到目前为止,蛋白质结构解析的方法主要是两种,x射线衍射和NMR。近年来还出现了一种新的方法,叫做Electron Microscopy。其中X射线的方法产生的更
-
电泳切胶小窍门
电泳切胶注意事项:1.电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。2.切胶是要把整
-
蛋白质纯化离子交换法
各种蛋白质分子上可能带有不同的电性,经过离子交换管柱,可依其分子带电性的差异而分离开来 (Pharmacia 操作手册, Ion Exchange)。仪器设备:
-
蛋白质的提取及粗分离
基本原理分离纯化蛋白质,首先要从原材料中提取目的蛋白,然后通过粗分离的方法除去大量杂质,最后进行精细分离,得到目的蛋白。本实验以新型基因重组人TNF为例阐明重组
-
离子交换层析
简介离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆
-
离心技术原理
离心是蛋白质、酶、核酸及细胞亚组分分离的最常用的方法之一,也是生化实验室中常用的分离、纯化或澄清的方法。尤其是超速冷冻离心已经成为研究生物大分子实验室中的常用技
-
蛋白质相互作用实验方法
免疫共沉淀和亲和层析共分离:免疫共沉淀是证明蛋白质-蛋白质相互作用的最直接最经典和最有效的方法,如蛋白A能与B相互作用结合成异源二聚体,无论用抗A或抗B的抗体或
-
无表面活性剂的膜蛋白提取方法
膜蛋白具有许多重要的细胞功能,对生物体存在至关重要。他们具有超过 60% 的药物靶点,占细胞总蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白,跨膜蛋白和外周膜蛋
-
凝胶层析
凝胶层析又称为分子筛层析或凝胶过滤。具有分子筛作用的物质很多,如浮石、琼脂、琼脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝胶等。以葡聚糖凝胶应用最广,商品名是sepha