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Electrophoretic Mobility Shift Assay--电泳迁移率检测
凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,最初用
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提高蛋白质的稳定性
葡萄糖异构酶(GI)在工业上应用广泛,为提高其热稳定性,朱国萍等人在确定第138位甘氨酸(Gly138)为目标氨基酸后,用双引物法对GI基因进行体外定点诱变,以
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western blot试验心得
前两天做了一个western blot,现在把试验中的一点小小的体会发上来,与大家交流,希望大家多多指点! 1 本实验室采用的脱脂奶粉已经存放了近两年了,虽然是
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KLRG1四聚物的合成方法
杀伤细胞凝集素样受体G1期( KLRG1 )是II型跨膜糖蛋白抑制性受体,属于C型凝集素样家族。KLRG1以单体和二硫键连接的二聚体形式存在。KLRG1四聚体可
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溶菌酶的制备、纯化和鉴定原理和方法
实验概要 制备、纯化和鉴定溶菌酶实验原理溶菌酶,全称为1,4-β-N-溶菌酶,又称粘肽N-乙酰基胞壁酰水解酶,属于α-乳白蛋白家族。人们对溶菌酶的研究始于上世纪
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GST-pulldown操作流程
实验目的:体外检测蛋白质与蛋白质之间相互作用。用于验证两个已知蛋白的相互作用,或者筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。实验原理:利用重组技术将探针蛋白与GST(G
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western blot技术资料
试剂耗材:SDS、甘油、Tris、溴酚蓝、丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺、TEMED,APS、甘氨酸、甲醇、PVDF膜、Brandford蛋白定量试剂盒、BSA、脱脂奶
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蛋白质Western Blot 低成本快速半干转印方法
随着半干转印系统不断进步,有越来越多的方法被应用于加速转印过程。例如,用户可以通过更换转印缓冲液、使用不同的转印装置,或调整转印条件、修改实验设计,从而缩短实验
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分裂泛素化膜酵母双杂交(MYTH)系统:鉴别蛋白质相互作用的有力工具
完整膜蛋白在基本生物学和临床上的重要性,使得高通量鉴别全长跨膜蛋白质相互作用的酵母双杂交系统得以快速发展,因此我们实验室发提出了分裂泛素化膜酵母双杂交(MYTH
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做磷酸化蛋白的western blot之我见
我做了很久的western blot,尤其是phospho-抗体,可以算是达人了。我根据自己的经验,对磷酸化蛋白之western blot提出以下建议,供刚入门
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半干法和湿法Western Blot转膜
在电流的作用下,使蛋白质从胶转移至固相载体(膜)上。膜的选择:印迹中常用的固相材料有NC膜、DBM、DDT、尼龙膜、PVDF等。我们选用PVDF(聚偏二氟乙烯)
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蛋白质的检测与分析――Western blot 操作大全
蛋白质的检测与分析――western blot 操作步骤一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法
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详细版:western-blotting实验方案
本文详细介绍western-blotting的实验方法步骤,主要包括了配胶、样品处理、电泳、转膜、封闭及杂交、发光鉴定、增强敏感性、NC膜的多次使用等7个方面的
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转染细胞的稳定筛选方法
1.确定抗生素作用的最佳浓度:不同的细胞株对各种抗生素有不同的敏感性,因此在筛选前要做预试验,确定抗生素对所选择细胞的最低作用浓度。① 提前24 小时在96 孔
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Northern blotting
Northern 杂交(Northern blotting) 1979年,J.C.Alwine等提出:将电泳凝胶中的RNA转移到叠氮化的或其他化学修饰的活性