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杂交瘤技术基本程序与方法
一、杂交瘤技术的诞生淋巴细胞杂交瘤技术的诞生是几十年来免疫学在理论和技术两方面发展的必然结果，抗体生成的克隆选择学说、抗体基因的研究、抗体结构与生物合成以及其多
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辛酸/硫酸铵法提纯IgG
一、原理在酸性条件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短链脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要为IgG，再用硫酸铵沉淀上清，即
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抗体纯化：SPA-sepharose cl-4b 亲合层析法
一、原理葡萄球菌a蛋白（SPA）具有与多种哺乳动物IgG分子fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。改变pH及离子强度可洗脱结合于SPA-sepH
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抗体纯化：deae-sephadex a-50 柱层析法
一、原理deae-sephadex a-50（二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50）为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血
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双向琼脂扩散实验
一、原理 双向琼脂扩散实验，是将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板内的相邻小孔中。两者相互扩散,当扩散到他们的浓度比例合适的部位相遇时,就会形成抗原抗体复合物的沉
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免疫火箭电泳技术
一、原理定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中，在电场作用下，引起抗原抗体的迁移和相互反应，当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰，由于电泳继续进行，样品
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巨噬细胞的纯化
一、用帖壁法纯化巨噬细胞 1．用含20％～40％小牛血清的RPMI-1640培养液将巨噬细胞配成2106 ～4106 /ml的浓度。以每平方厘米2105 ～4
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流式细胞术中为什么要用同型对照？如何选择同
一、为什么要用同型对照？ 同 型对照是使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免疫球蛋白及亚型的免疫球蛋白，用于消除由于抗体非特异性与细胞结合而产生的
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免疫组化双染实验流程
一、脱蜡和水化方法同SP法。二、第一抗体的染色1、将切片浸在3%H2 O2 甲醇溶液（新鲜配制）中10 min，PBS冲洗3 min3次；2、加100 ul（2
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流式细胞术分离法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞
一、试剂及配制1. RPMI-1640培养基：应选购不含酚红的，使用时加入5%的小牛血清。2. FITC-抗CD3单克隆抗体：FITC为异硫氰酸荧光素，CD3为
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辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG
一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白
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抗体的功能
一、识别并特异性结合抗原（ Recognition and bind antigen specifically ） 识别并特异性结合抗原是免疫球蛋白分子的主要功
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石蜡切片时的小技巧
一 、石蜡切片方法步骤： 在每次操作切片刀和标本，或更换标本前一定要锁定手轮，并用护刀罩将刀 刃遮住！锁定手轮， 应先夹紧标本再装切片刀
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流式细胞仪多色染色与同型对照抗体选择与搭配
一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的：流式细胞仪能检测多少个通道需要同时检测检测多少个指标厂家的抗体有多少种荧光标记如果流式细胞
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多克隆抗体的提取纯化
一、批量提取法称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50g，置于1000ml烧杯中，先以蒸馏水漂浮除去细颗粒，再经酸碱处理后，用0.01～0.05mol/L
