免疫技术

免疫中和反应技术(Neutralization test technique)：固定血清稀释病毒法

2025-05-30 免疫技术加入收藏

病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力，谓之中和试验。本试验主要用于： ① 从待检血清中检出抗体，或从病料中检出病毒，从而诊断病毒性传染病； ②

病毒或毒素与相应的抗体结合后，失去对易感动物的致病力，谓之中和试验。本试验主要用于： ① 从待检血清中检出抗体，或从病料中检出病毒，从而诊断病毒性传染病； ② 用抗毒素血清检查材料中的毒素或鉴定细菌的毒素类型； ③ 测定抗病毒血清或抗毒素效价； ④ 新分离病毒的鉴定和分型，中和试验不仅可在易感的实验动物体内进行，亦可在细胞培养上或鸡胚上进行。试验方法主要有简单定性试验、固定血清稀释病毒法、固定病毒稀释血清法、空斑减少法等。

本法多将病毒作 10 倍递增稀释，分置 2 列试管，第一列加正常血清（对照组），第二列加待检血清（试验组）。混合后，置 37 ℃ 作用 1h ，将各管混合液分别接种选定的试验动物，每一稀释度用 3 ～ 5 只动物。接种后，逐日观察，并记录其死亡数，观察结束后，计算 LD50 和中和指数，本法适用于大量检样的检测。

表固定血清稀释病毒法术式

混合前

病毒稀释

2 × 10-1

2 × 10-2

2 × 10-3

2 × 10-4

2 × 10-5

2 × 10-6

2 × 10-7

正常

血清