中性粒细胞功能硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力的测定
试剂及材料1. 0.1%明胶-Hanks液2. 0.01mol/L KCN3. 0.1% NBT4. 酵母多糖处理血清操作方法1. 分离中性粒细胞,调整细胞浓度
试剂及材料
1. 0.1%明胶-Hanks液
2. 0.01mol/L KCN
3. 0.1% NBT
4. 酵母多糖处理血清
操作方法
1. 分离中性粒细胞,调整细胞浓度至107 /ml;
2. 按下表依次加样:
静止时NBT的还原能力 | 激活时NBT的还原能力 | ||
0.1%白明胶-Hanks液 | 0.25ml | 0.1%白明胶-Hanks液 | 0.2ml |
0.01mol/L KCN | 0.1ml | 0.01mol/L KCN | 0.1ml |
0.1% NBT | 0.4ml | 0.1% NBT | 0.4ml |
酵母多糖处理血清 | 0.05ml | ||
+中性粒细胞(107 /ml) | 0.25ml | +中性粒细胞(107 /ml) | 0.25ml |
3. 放37℃反应15min,加0.5mol/L HCl 10ml,2000r/min离心15min,弃上清;
4. 加呲啶2ml,沸水煮10min,2000r/min离心10min,测OD515值。
结果分析
中性粒细胞的功能强弱与呈色反应的深浅成正比。