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免疫技术

中性粒细胞功能硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力的测定

2025-07-17 免疫技术 加入收藏
试剂及材料1. 0.1%明胶-Hanks液2. 0.01mol/L KCN3. 0.1% NBT4. 酵母多糖处理血清操作方法1. 分离中性粒细胞,调整细胞浓度

试剂及材料

1. 0.1%明胶-Hanks液

2. 0.01mol/L KCN

3. 0.1% NBT

4. 酵母多糖处理血清

操作方法

1. 分离中性粒细胞,调整细胞浓度至107 /ml;

2. 按下表依次加样:

静止时NBT的还原能力激活时NBT的还原能力

0.1%白明胶-Hanks液0.25ml0.1%白明胶-Hanks液0.2ml
0.01mol/L KCN0.1ml0.01mol/L KCN0.1ml
0.1% NBT0.4ml0.1% NBT0.4ml


酵母多糖处理血清0.05ml
+中性粒细胞(107 /ml)0.25ml+中性粒细胞(107 /ml)0.25ml

3. 放37℃反应15min,加0.5mol/L HCl 10ml,2000r/min离心15min,弃上清;

4. 加呲啶2ml,沸水煮10min,2000r/min离心10min,测OD515值。

结果分析

中性粒细胞的功能强弱与呈色反应的深浅成正比。


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