测序反应实验
测序反应实验
材料与仪器
循环测序试剂盒 引物和模板
薄壁 PCR 管 热循环仪 GeneAmpPCRSystem9700 仪
薄壁 PCR 管 热循环仪 GeneAmpPCRSystem9700 仪
步骤
一、材料
1. 缓冲液和溶液
ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒
2. 核酸和寡核苷酸
引物和模板
3. 特殊设备
DNA 扩增用薄壁 PCR 管
热循环仪,GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品
二、方法
1. 将适量(如上所述)的引物和模板加入到 PCR 管中。
2. 每管加入 4ul Terminator Ready Reaction mix。
这是说明书中推荐用董的一半,这一用董已经足够,而且节省试剂。
3. 用去离子水补至 20ul, 混匀,稍离心。
4. 在 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems) 或相当产品的仪器上,执行下列程序。
5. 上步反应结束后,反应产物可立即纯化或-20°C 保存以备将来纯化。
1. 缓冲液和溶液
ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环测序试剂盒
2. 核酸和寡核苷酸
引物和模板
3. 特殊设备
DNA 扩增用薄壁 PCR 管
热循环仪,GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems) 仪或相当产品
二、方法
1. 将适量(如上所述)的引物和模板加入到 PCR 管中。
2. 每管加入 4ul Terminator Ready Reaction mix。
这是说明书中推荐用董的一半,这一用董已经足够,而且节省试剂。
3. 用去离子水补至 20ul, 混匀,稍离心。
4. 在 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems) 或相当产品的仪器上,执行下列程序。

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