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IPTG诱导pET载体目的蛋白表达的原因分析
1)噬菌体DE3溶源化的菌株如BL21(DE3)是最常用的表达菌株,噬菌体DE3是λ噬菌体的衍生株,构建好的表达载体 可以直接转入表达菌株中,诱导蛋白的表达方式
2024-11-27 160 -
12种非必需氨基酸的作用
氨基酸是蛋白质的组成部分,而蛋白质是肌肉,腺体,器官,肌腱,酶,指甲和头发的组成部分。这使氨基酸的地位变得至关重要。尽管我们掌握很多关于维生素的知识,但大部分人
2024-11-27 24 -
LORRY法蛋白定量的实验步骤和需知事项
蛋白定量 的方法主要有以下三种:BCA法、考马斯亮蓝法和Lorry法。其中LORRY法蛋白定量也就是利用菲林-酚试剂法对蛋白质含量进行测定的实验方法。本文主要对
2024-11-27 24 -
荧光淬灭法蛋白质定量实验方法与结果分析
蛋白组学研究是建立在蛋白定量 的基础上的,蛋白质快速定量主要原理是依据蛋白自身的发色基团或者和显色试剂间反应物的紫外吸收值来进行定量的,蛋白定量最常用的方法主要
2024-11-27 48 -
蛋白质二维电泳技术原理简介
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳 技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二
2024-11-27 28 -
免疫共沉淀和免疫沉淀的图示和实验步骤
免疫沉淀(IP)是一种利用的抗原 抗体反应的原则,确定具体反应中混合物的抗体蛋白数量及具体物理特性的方法。而免疫共沉淀(Co-IP) 则作为分析蛋白质间的相互作
2024-11-27 21 -
三种融合蛋白表达系统常见问题
研究者们在分离到某一基因后,要对其编码蛋白质进行研究最理所当然的工作就是表达――即:有目的性地合成外源基因产物。在重组 DNA技术的发展早期,人们认为在基因的前
2024-11-27 22 -
二肽的概念与二肽合成的个人心得体会
一个氨基酸羧基与另一个氨基酸的氨基失水形成的化合物成为二肽,二肽是最简单的多肽。本文总结了二肽的基础知识以及二肽合成的经验。二肽的基础知识二肽的概念二肽(dip
2024-11-27 19 -
纸层析法:分离鉴定氨基酸实验
纸层析法是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。本文主要介绍了纸层析法分离鉴定氨基酸的实验原理、器材和具体操
2024-11-27 31 -
蛋白不表达的原因知识汇总
做蛋白表达 实验的时候,有时候实验会觉得参考实验方法和克隆的蛋白基因序列完全没有问题,蛋白电泳就是没有结果。就个人经验总结和一些网络资源汇总了下蛋白不表达的原因
2024-11-27 28 -
Bradford法测蛋白质浓度——完整版
Bradford法测蛋白质浓度一、实验目的配制一组浓度分别为0.10mg/ml ,0.08mg/ml,0.06mg/ml ,0.04mg/ml ,0.02mg/
2024-11-27 26 -
精氨酸的作用与副作用
精氨酸(arginine)是一种脂肪族的碱性的含有胍基的极性α氨基酸,在生理条件下带正电荷。L-精氨酸是蛋白质合成中的编码氨基酸,哺乳动物 必需氨基酸和生糖氨基
2024-11-27 22 -
在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的全攻略
蛋白表达技术全攻略本世纪60至70年代对大肠杆菌的研究使之成为自然界中最普遍为人们所认识的生物体。大肠杆菌具有两个显著特征:操作简单和能在廉价的培养基中高密度培
2024-11-27 355 -
磷酸化蛋白的免疫印迹检测经验总结
磷酸化蛋白的Western Blotting检测是信号通路研究中的经典方法。然而,有时会遇到一些问题,例如,磷酸化抗体检测不到总蛋白,不知道如何使用lysis
2024-11-27 29 -
检测蛋白磷酸化的六种方法及其优缺点
磷酸化评估蛋白激酶将磷酸基团从ATP转移到蛋白多肽底物上的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基,直接影响目标的活性和功能。放射性研究表明,真核细胞中大约30%的蛋白经过磷
2024-11-27 45