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RT-PCR在基因表达(gene expression)检测中的应用
基因表达的检测方法基因表达的检测有几种方法。经典的方法(仍然重要)是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分
2024-11-12 27 -
实时荧光定量PCR
聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对
2024-11-12 22 -
逆转录-聚合酶链反应实验方法
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中
2024-11-12 21 -
RNA 提取策略及RT-PCR技术
第一部分RNA 提取策略1、RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因,因为人体细胞自身就是几十分钟(20min?)mRNA被降解一轮,所以
2024-11-12 20 -
RT-PCR实验步骤
实验材料:水稻叶片的 RNA 。实验原理:目前 PCR 技术只能扩增 DNA 模板,对 RNA 模板不能直接扩增。mRNA反转录生成的 cDNA 可作为 PCR
2024-11-12 24 -
逆转录(RT)实验步骤
一、准备工作1、实验器具与材料:(1)移液枪:200ul、10ul(2)吸头:200ul、20ul(3)EP管1。5ml、100ul(4)水浴箱2、实验器具的处
2024-11-12 27 -
RT-PCR步骤
总RNA提取1. 取200mg组织,放到1.5ml EP管中,加入1ml Trizol剪碎。2. 震荡30s。3. 加0.2ml氯仿,剧烈摇动30s,室温3mi
2024-11-12 27 -
ROX Standard
The final working concentration of ROX Standard in the PCR buffer is 0.5 µMolar
2024-11-12 26 -
Amplification and Labelling with Cy dyes
1.Two rounds of DNA synthesis to incorporate fixed sequencesPrepare the followin
2024-11-12 22 -
Protocol for Annealing Oligonucleotides
1. Prepare a solution of 10X annealing buffer. 10 mM MgCl2 , 200 mM Tris-HCl,
2024-11-12 25 -
临床拭子标本DNA PCR反应模板的制备
此方法适用于各种拭子标本(鼻、咽、口腔和生殖道等)中DNA的快速制备。试剂与配制PBS-2Fungi-Bact液;生理盐水;无水乙醇;TE缓冲液;钾缓冲液:50
2024-11-12 24 -
PCR技术在骨肿瘤研究中的应用
1、在骨肿瘤发病机理研究中的应用骨恶性肿瘤是多种癌基因多阶段多途径协同作用的结果,到目前为止,发现与骨恶性肿瘤密切相关的癌基因有K-ras、c-fos、proα
2024-11-12 26 -
PCR技术在骨肿瘤诊断中的应用
骨肿瘤诊断需要解剖学、组织学和胚胎学等基础知识,对病变需认真观察,仔细分析,但更重要的是对临床资料及X线所见要特别重视。骨肿瘤形态变异较大,而临床X线观察较全面
2024-11-12 25 -
VERSA 100 Mini PCR用于自动实时定量PCR反应体系的建立
PCR技术通常是定性检测特定 RNA与DNA序列的常规方法。而现在,实时定量 PCR技术已经越来越成熟,在病原体检测领域中有突出的优势,并已在医疗诊断领域中崭露
2024-11-12 18 -
PCR的运用
PCR除了是一个诊断工具外,更重要的是它有广泛的运用。PCR本身可直接用来鉴定特定基因的存在与否,也可以用来侦测基因是否有异常 (Gene mutation,
2024-11-12 24