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PCR反应模板的制备
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量。模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要。模板处理方法的选择及操作人员的基本技能,
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荧光定量PCR:简介、原理、应用
荧光定量PCR简介荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年
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什么是TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)
在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列,TAIL-PCR又叫热不对称交错PCR,能够较好地解决上述难题。该
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PCR反应中Taq酶的选择
随着分子生物学研究发展的不断广泛和深入,PCR已成为一门相当成熟的常规技术,而热聚合酶(即Taq酶)的合理选择是PCR成败与否的一个关键因素。目前市面上有多种T
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实时荧光PCR检测技术
众所周知,PCR(聚合酶链反应)技术自从1985年问世以来,经过十几年的发展,已成为实验室的常规技术。它是现代分子生物学研究中不可缺少的手段,是一种极为敏感的放
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PCR技术 PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将
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PCR反应体系的循环参数
1、变性温度和时间:模板DNA和PCR产物的变性不充分是PCR失败的主要原因。适宜的变性条件是95℃ 30s或97℃15s。变性不完全,DNA双链会很快复性,因
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PCR不必“摸条件”
PCR是分子生物学科研人员必做的实验,为了扩增目的基因,经常要对PCR的体系进行“摸条件”,特别是一些GC含量高的目的基因或者DNA纯度不高的样本! “摸条件”
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β-actin 的引物序列
常用的β-actin 引物序列human actin f ctc cat cct ggc ctc gct gt human actin r gct gtc ac
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引物设计实例分析(多图)
引物设计基本原则引物长度(primer length)产物长度(product length)序列Tm值 (melting temperature)G+C含量(
2024-11-15 27 -
Real-time PCR 的探针如何设计
自90年代Taqman探针诞生以来,虽然荧光探针(引物)不断有新的技术出现,但是作为一种经典的定量PCR技术,Taqman探针技术仍然是许多实验研究人员进行定量
2024-11-15 27 -
常规PCR技术及几类PCR新技术的介绍
热启动PCR热启动PCR是除了好的引物设计之外,提高PCR特异性最重要的方法之一。尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃,聚合酶在室温仍然有活性。因此,
2024-11-15 26 -
PCR之歌
这是biorad公司为了推出新产品而编写的一首PCR之歌,一群可爱的人把PCR的过程唱的如此深情,好像是P疯的感觉。英文歌词:There was a time
2024-11-15 26 -
引物设计原则(Principle of real-time quantiation PCR primer )
1、引物的长度一般为15-30bp,常用的是18-27bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74C,不适于Taq DNA聚合酶进行反应。2、引物序列
2024-11-15 18 -
PCR技术的原理与方法
PCR定义PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过
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