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鼠肝细胞原代培养实验方法
一、 实验材料:6-8周龄大小鼠;剪刀,镊子,灌流用针头,连接管,玻璃平皿,细胞筛,冰盒二、实验方法:1. 培养用液洗涤培养基:DMEM基础培养基:DMEM/F
2024-12-07 112 -
脐静脉内皮细胞培养
一、试剂和缓冲液配制1、胎牛血清(氯化十六烷基吡啶)(1)解冻胎牛血清(2)在56℃加热30分钟(脱补体作用,盖上瓶)(3)取25ml上述液体放在无菌的50ml
2024-12-07 59 -
自行配制DMEM的方法及说明书
这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明(普通高糖的DMEM培养基配法是一样的):TO PREPARE 1*LIQUID1.、Measrue out 5%
2024-12-07 89 -
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外源蛋白的表达
[实验原理]SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)是蛋白分析中最经常使用的一种方法。它是将蛋白样品同离子型去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS)以及巯基乙醇一起
2024-12-07 81 -
蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验
[原理]蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4gSDS/1g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物,该复
2024-12-07 72 -
蛋白质凝胶电泳的操作方法
【材料与试剂】(1)2SDS凝胶加样缓冲液(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳槽和电泳仪(3)加样器和吸头等(4)水浴锅【操作方法】(1) 把上述处理的样品按1:1(V/V
2024-12-07 78 -
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法—蛋白质的分子量测定
【实验目的】1.掌握SDS—聚丙烯酰胺电泳法的原理。2.学会用此种方法测定蛋白质的分子量。【实验原理】SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是对蛋白质进
2024-12-07 85 -
聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳
【实验目的】1.掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。2.学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作技术,用于分离蛋白质。【实验原理】聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺作为
2024-12-07 74 -
SDS-PAGE常见问题分析
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响?在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液
2024-12-07 93 -
双向电泳各步骤注意事项
1. 总的策略① 化学试剂纯度要高,至少是分析级,目前国产试剂达不到纯度要求② 使用去离子水(电导<2uS)③ 尿素和丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺需新鲜配制④
2024-12-07 107 -
蛋白等电聚焦凝胶电泳技术
1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体
2024-12-07 101 -
聚丙烯酰胺凝胶选择指导
Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶,包括不同的成分,百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度,缓冲系统,上样孔格式以及胶的厚度,对于获得最
2024-12-07 102 -
实验技巧:SDS-PAGE 电泳常见问题及指南
Q:SDS-PAGE 电泳的基本原理?A:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS(十二烷基硫酸钠), SDS 会与变性的多肽,并使蛋白
2024-12-07 103 -
SDS-PAGE原理
SDS电泳技术首先在1967年由Shapiro建立,1969年由Weber和Osborn进一步完善。当在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶系统中加入SDS后,则蛋白质分子
2024-12-07 87 -
等电聚焦
等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质,当通以直流电时,两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度,当蛋白质放进此体系时,不同的蛋白质即移动到或聚焦
2024-12-07 85