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培养细胞中RNA提取及检测
简介RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，
2024-06-13 79 -
组织块中RNA提取及检测
简介RNA的提取通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，
2024-06-13 69 -
RNA 干扰技术
简介转录后基因沉默机制（post-transcriptional gene silencing，PTGS）被称为RNA干扰（RNAi），与mRNA对应的正义RN
2024-06-13 74 -
荧光原位杂交实验基本方案
材料与仪器样品DNA探针 非同位素 甲酰胺 杂交混合液 甲酰胺 Triton X-100 SSC相差显微镜 盖玻片 水浴锅 加湿盒 滤光片 荧光显微镜步骤1a.
2024-06-13 82 -
荧光原位杂交实验（荧光原位杂交技术）
原理用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原则，与待检材料中未知的单链核酸进行异性结合，形成可被检测的杂交双链核酸。由于DNA分子在染色体上是沿着染色体纵轴
2024-06-13 75 -
RAPD（随机扩增多态性DNA）分析技术
原理RAPD作为单引物的PCR扩增产物，其产生机理是引物首先结合到模板链，沿模板5'端方向延伸而产生不同长度的DNA片段，然后以这些片段为模板继续大量扩
2024-06-13 84 -
质粒DNA的限制性内切酶酶切分析
简介实验目的学习和掌握限制性内切酶的特性掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。相关基础知识限制性核酸内切酶
2024-06-13 95 -
酶切实验
原理采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单，但双酶切如果两种酶所用缓
2024-06-13 98 -
甲醛洋菜胶体电泳
原理rRNA 占细胞RNA总量的80~85%,以ethidium bromide 染色后，呈现于胶体上的两个主要RNA色带应该分别是large 与small r
2024-06-13 62 -
单核苷酸多态性（SNP）实验基本方案
原理由于单个核苷酸改变而导致的核酸序列多态性(Polymorphism)。据估计，在人类基因组中，大约每千个碱基中有一个SNP，无论是比较于限制性片段长度多态性
2024-06-13 95 -
凝胶迁移实验（EMSA）（凝胶迁移）
原理一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白，目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的
2024-06-13 125 -
变性梯度凝胶电泳(DGGE)
原理1. 变性梯度凝胶电泳（DGGE）是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链，称之为变性。核酸50%发生变性时
2024-06-13 80 -
原位杂交实验要求及步骤
原理根据探针的标记物是否直接被检测，原位杂交又可分为直接法和间接法两类。直接法主要用放射性同位素、荧光及某些酶标记的探针与靶核酸进行杂交，杂交后分别通过放射自显
2024-06-13 81 -
DNA 序列分析技术
原理本节描述运用Perkin-Elmer 公司的373 和377 型全自动DNA 测序仪进行双链DNA 测序的方法。热循环测序反应使用 Applied Bios
2024-06-13 80 -
质粒的制备（构建载体）
原理在pH 12.0 ~ 12.6碱性环境中，细菌的线性大分子量染色体DNA变性分开，而共价闭环的质粒DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调至中性并有高盐
2024-06-13 71
