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重组质粒的连接、转化及筛选
原理用特定的限制性内切酶切割载体DNA和外源DNA片段并进行纯化，于体外使两者相连接(若用T-载体，可直接用纯化的PCR产物进行连接)，转化宿主细菌后，利用蓝白
2024-06-13 126 -
转染细胞的稳定筛选实验
原理外源基因转染真核细胞后整合入基因组DNA，能够长期存在于细胞中，随染色体复制而传给子代。外源基因进入培养细胞一般要经过几天才能够整合入基因组DNA。材料与仪
2024-06-13 112 -
亚硫酸氢盐修饰后测序法检测甲基化（DNA甲基化）
原理重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变，用PCR扩增（引物设计时尽量避免有CpG，以免受甲基化因素的影响）所需
2024-06-13 125 -
多药抗药基因的表达实验（PCR扩增法）
原理大多MDR细胞膜上出现MDR-1基因及其基因产物P-糖蛋白过度表达。 多药抗药基因的表达实验是通过反转录和PCR的方法来检测这些特定基因的过度表达。材料与仪
2024-06-13 130 -
核酸纯度、浓度与分子量测定实验（Ethidium bromide染色法）
原理利用一系列不同浓度的DNA标准溶液（0、2.5、5、10、20、30、40、50 ng/ml），或已知浓度的DNA marker，和未知浓度DNA样品一起进
2024-06-13 163 -
核酸纯度、浓度与分子量测定实验（紫外分光光度法）
原理溴化乙锭是一种荧光染料，在凝胶电泳中，EB分子可嵌入核酸双链的碱基对之间，在紫外线激发下发出荧光，其强度与DNA量成正比。同时核酸最大吸收波长在260 nm
2024-06-13 130 -
微生物液体培养实验（细菌培养的检测）
材料与仪器细菌显微镜 玻片 盖玻片 滴管步骤一、利用计数板检测 1. 用一片干净的盖玻片盖住一片干净的计数玻片或者petraff-Hausser小室，参见下面
2024-06-13 104 -
微生物液体培养实验（大体积培养法）
材料与仪器细菌胰化蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 NaOH接种针 培养瓶 摇床步骤1. 按1：100的比例将过夜培养物加入到一个无菌烧瓶中，烧瓶的体积应该是培养液
2024-06-13 98 -
微生物液体培养实验（过夜培养法）
材料与仪器细菌胰化蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 NaOH接种针 培养瓶 摇床步骤1. 取5 ml 液体培养基加入一支无菌的16 mm 或18 mm 的培养试管中
2024-06-13 140 -
微生物固体培养实验（涂布法）
材料与仪器细菌涂布棒 培养箱 培养皿步骤一、实验准备 1. 涂布棒 （1）加热并弯曲一支直径4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制备涂布棒。（2）灭菌，将涂布棒的三
2024-06-13 111 -
微生物固体培养实验（平板划线法）
材料与仪器细菌接种环 培养皿步骤一、实验准备 1. 接种环 （1）灭菌，将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。 （2）冷却，将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至
2024-06-13 117 -
微生物固体培养实验（连续稀释法）
材料与仪器细菌胰化蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 NaOH培养瓶 玻璃棒 离心管 摇床步骤1. 在3个无菌培养试管中各加人5 ml LB培养液，并标上序号1、2、
2024-06-13 110 -
脉冲场凝胶电泳实验（倒转电场）
材料与仪器DNAGTBE TBE 琼脂糖电泳仪步骤1. 制备用于水平电泳的1%琼脂糖凝胶，放入电泳装置，其上覆盖以2~3 mm 的GTBE或TBE缓冲液。 2
2024-06-13 111 -
筛分型琼脂糖凝胶电泳实验（电泳实验）
材料与仪器DNATAE 琼脂糖电泳仪步骤1. 在TAE电泳缓冲液中熔化3%~5%低熔点筛分型琼脂糖。将胶倒入普通琼脂糖凝胶装置中。2. 与普通琼脂糖凝胶一样
2024-06-13 92 -
Southern 印迹实验（电转印法）
原理因为聚丙烯酰胺凝胶的扎径太小，DNA不能在其横截面上有效地扩散，毛细管转移法不适用DNA从聚丙烯酰胺凝胶的转移。因此，聚丙烯酰胺凝晈必须在低离子强度的缓冲液
2024-06-13 108
