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脉冲场凝胶电泳实验(倒转电场)
材料与仪器DNAGTBE TBE 琼脂糖电泳仪步骤1. 制备用于水平电泳的1%琼脂糖凝胶,放入电泳装置,其上覆盖以2~3 mm 的GTBE或TBE缓冲液。 2
2024-06-13 75 -
筛分型琼脂糖凝胶电泳实验(电泳实验)
材料与仪器DNATAE 琼脂糖电泳仪步骤1. 在TAE电泳缓冲液中熔化3%~5%低熔点筛分型琼脂糖。将胶倒入普通琼脂糖凝胶装置中。2. 与普通琼脂糖凝胶一样
2024-06-13 61 -
Southern 印迹实验(电转印法)
原理因为聚丙烯酰胺凝胶的扎径太小,DNA不能在其横截面上有效地扩散,毛细管转移法不适用DNA从聚丙烯酰胺凝胶的转移。因此,聚丙烯酰胺凝晈必须在低离子强度的缓冲液
2024-06-13 75 -
Southern 印迹实验(向下毛细管转移法)
原理向上毛细管转移法的一个缺点是凝胶可能被加于其上面的加有重物的滤纸层和纸巾塔压紧,从而降低毛细管作用。材料与仪器DNASSC转移塔 滤纸步骤一、实验步骤1.
2024-06-13 62 -
Southern 印迹实验(碱性缓冲液法)
原理用带正电荷的尼龙膜时,如果用碱性转移缓冲液,则转移的DNA可共价结合于膜上。材料与仪器DNANaOH NaCl电泳仪步骤1. 印迹法中步骤1和歩骤2中所述
2024-06-13 80 -
Southern 印迹实验(印迹法)
原理本方案是专门为将琼脂糖凝胶印迹至不带电荷或带正电荷的尼龙膜上而设计的,稍作修改后同样可用于硝酸纤维素膜方法。材料与仪器DNAHCl NaCl Tris Na
2024-06-13 81 -
生物素酰化探针的制备实验(随即寡核苷酸引物合成法)
材料与仪器DNAdNTP 生物素 klenow酶 TE EDTA LiCl 乙醇离心机 培养箱步骤1. 在1. 5 ml 离心管中加入500 ng~2 μg
2024-06-13 71 -
生物素酰化探针的制备实验(切口平移法)
材料与仪器DNADNA聚合酶 dNTP 2-疏基乙醇 生物素 甘油 NaCl EDTA SDS 无水乙醇注射器 电泳仪 离心机 培养箱步骤1. 混合以下物质于
2024-06-13 69 -
生物素酰化探针的检测实验(化学发光法)
材料与仪器DNA生物素 磷酸酶紫外灯 离心机步骤1. 用夹子固定已转印的尼龙膜的边角于一小片干的吸水纸上,样品面朝上,放进温箱内12~80℃放15~30 mi
2024-06-13 75 -
生物素酰化探针的检测实验(比色法)
材料与仪器DNA磷酸酶缓冲液 封阻液 牛血清蛋白 TE NBT离心机 分光光度计 摇床步骤1. 用DNA稀释缓冲液,稀释生物素酰化标准DNA,浓度为0、1、2
2024-06-13 70 -
地高辛标记探针的化学发光检测实验(化学发光法)
材料与仪器DNA抗体步骤1. 用地髙辛标记探针与带DNA或RNA印迹的正电荷尼龙膜杂交。 2. 根据厂商的推荐条件,封闭和结合抗体。3. 对X光片曝光约2
2024-06-13 64 -
噬菌体文库的扩增实验基本方案
材料与仪器噬菌体MgSO4 麦芽糖 琼脂糖 氯仿 DMSO SM离心机 分光光度计 水浴锅步骤1. 制备铺平板菌(1)2.5 ml 新鲜过夜培养的宿主菌液接种
2024-06-13 78 -
粘粒和质粒文库的扩增实验基本方案
材料与仪器质粒LB 甘油硝酸纤维素膜 培养箱步骤1. 在含抗生素的平板上加一层硝酸纤维素膜,将抗药性细菌铺在硝酸纤维素膜上,培养细菌至菌落边缘正好相接。2.
2024-06-13 89 -
噬菌体文库的铺平板和转移实验基本方案
材料与仪器噬菌体琼脂糖 LB NaOH SSC Tris·Cl硝酸纤维素膜 培养箱步骤1. 通过系列等比稀释滴定噬菌体文库的滴度。 2. 重组噬菌体与铺平板
2024-06-13 82 -
粘粒及质粒文库的铺平板和转移实验基本方案
材料与仪器质粒LB NaOH 氯霉素 Tris·Cl NaCl硝酸纤维素滤膜 离心机 布氏漏斗 培养箱步骤1. 在含抗生素的平板上,通过系列等比稀释确定质粒和
2024-06-13 88